1.电流设置: 一般来说,较低的电流可以减少蛋白的热失活和电泳缓冲液的蒸发。对于小分子量的蛋白,常见的电流设置为20-30 mA。 2.转膜时间: 转膜时间的设置也与蛋白的大小有关。对于17kDa的蛋白,通常转膜时间为30-60min。 3.PVDF膜要求: 一般建议使用0.2或0.45微米的孔径的PVDF膜。
western转膜时间和电流 westernblot时一般的电流是多少,多长时间、(注我用的是湿转法,目的蛋白大约在40KD左右)... western blot 时 一般的电流是多少,多长时间、(注我用的是湿转法,目的蛋白大约在40KD左右) 展开 300mA90分钟,我们是1.0的胶厚度,要是0.75也行,但1.5m
(1)通常如果使用Bio-Rad的标准湿式转膜装置,可以设定转膜电流为300-400mA,转膜时间为30-60)分钟。也可以在15-20mA转膜过夜。转膜时也可以使用碧云天的多功能电泳仪(带定时)。具体的转膜时间要根据目的蛋白的大小而定,目的蛋白的分子量越大,需要的转膜时间越长,目的蛋白的分子量越小,需要的转膜时间...
解析 可以一起转 我一般90和43(beta-actin)一起,效果不错,也可以分开;一般是按胶的面积 1.5mA/cm2 恒流转 电压很低 10V之内 转2小时,如果你的弄的比较干 电压会大些10-20v 这时适当减小时间 1- 1.5小时这两个蛋白 大小...结果一 题目 做western,一个是91和86另一个是38,半干转的转膜时间及电流如何...
17kDa的蛋白还是推荐用0.2的膜,我们没有试过用0.45的膜来转小于20的蛋白,很容易跑出去。转膜的...
做western,一个是91和86另一个是38,半干转的转膜时间及电流如何计算?胶的浓度多大好些,发光时间,谢谢 可以一起转 我一般90和43(beta-actin)一起,效果不错,也可以分开;一般是按胶的面积 1.5mA/cm2 恒流转 电压很低 10V之内 转2小时,如果你的弄的比较干 电压会大
10%的胶即可,半干转我一般习惯用300mA,50-120min.可以先转100min试试;如果38的表达量不高,尽量不要超过50min.时间充足的话,这两个蛋白可以分开转。发光时间一般3-5min
17kDa的蛋白还是推荐用0.2的膜,我们没有试过用0.45的膜来转小于20的蛋白,很容易跑出去。转膜的...
western转膜时间和电流 300mA90分钟,我们是1.0的胶厚度,要是0.75也行,但1.5mm的厚胶要时间长一些,另外你做的蛋白如果超过100kd建议时间更长一些,若是小蛋白就减少转模时间,立春红确定最适时间