该方法灵敏度高,且样品用量小,适合微量样品的SOD检测。Xanthine氧化酶法:该方法利用黄嘌呤氧化酶催化黄嘌呤生成超氧阴离子,随后通过测定SOD对黄嘌呤氧化酶反应的抑制作用来计算其活性。此方法具有较高的灵敏度和特异性,适合细胞、血清、组织样品的SOD活性测定。四、SOD检测的实验步骤 以比色法为例,SOD检测的基本...
超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)是生物体内普遍存在的参与氧代谢的一种含金属酶(有Cu-Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD三种类型)。该酶与植物的衰老及抗逆性密切相关,是植物体内重要的保护酶之一,因此SOD活性的测定在研究植物衰老及抗逆机制中有着重要意义。本文将会介绍超氧化物岐化酶活性测定的原理、方法...
当加入SOD时,可以使超氧自由基与H+结合生成H2O2和O2,从而抑制了NBT光还原的进行,使蓝色二甲腊生成速度减慢。通过在反应液中加入不同量的SOD酶液,光照一定时间后测定560 nm波长下各液光密度值,抑制NBT光还原相对百分率与酶活性在一定范围内呈正比,以酶液加入量为横坐标, 以抑制NBT光还原相对百分率为纵坐标,在坐标...
超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,简称SOD)是一种关键的抗氧化酶,对维持生物体的健康状态具有不可替代的作用。因此,准确、高效地检测超氧化物歧化酶的活性对于理解其在生物体内的功能、评估生物体的抗氧化能力以及疾病诊断与治疗具有重要意义。本文将介绍超氧化物歧化酶检测的方法、意义以及在实际应用中的价值。
由于超氧自由基非常不稳定且寿命极短,因此通常采用间接方法来测定SOD的活性。本实验利用SOD抑制氮蓝四唑(NBT)在光下的还原作用来评估其活性。在有氧化物质存在时,核黄素在光照条件下被还原,进而产生超氧阴离子自由基。这些自由基能将NBT还原为蓝色的甲腙,该产物在560nm处有最大光吸收。当加入SOD时,它会...
超氧化物歧化酶(SOD)浓度测定 简介 小鼠SOD 测定采用酶联免疫吸附试验(ELISA)。通过双抗体一步夹心法,在包被 SOD 抗体的 96 孔板中,加入标本、标准品、HRP 标记的检测抗体,通过恒温培养箱温育并彻底洗涤。 加入底物 TMB 显色,TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅...
具体步骤包括SOD酶液的提取、显色反应等,即将植物叶片研磨后离心得到SOD粗提液,显色反应色通过NBT等试剂完成。材料和试剂包括磷酸缓冲液、甲硫氨酸(Met)溶液、氮蓝四唑(NBT)溶液、EDTA-Na2溶液、核黄素溶液等。要测定的是SOD的活性,因此,需要有标准品进行至少6个点的梯度稀释,并参与反应,从而获得对应的...
SOD测定虽然是一种非特异的辅助诊断指标,但对机体自由基代谢紊乱、自由基清除干预对策、以及对于同一病患者病程转归(自由基损伤的加剧或降低、自由基清除剂药物或手术治疗效果)的判断,实时动态监测具有重要参考价值。 SOD水平降低: (1)生理降低见于: ①机体抗氧化营...
具体步骤包括SOD酶液的提取、显色反应等,即将植物叶片研磨后离心得到SOD粗提液,显色反应色通过NBT等试剂完成。材料和试剂包括磷酸缓冲液、甲硫氨酸(Met)溶液、氮蓝四唑(NBT)溶液、EDTA-Na2溶液、核黄素溶液等。 要测定的是SOD的活性,因此,需要有标准品进行至少6个点的梯度稀释,并参与反应,从而获得对应的吸光度...