本发明的去内毒素的质粒提取方法和试剂盒,在中和沉淀液中加入了多聚磷酸,执行步骤S3时:“加入中和沉淀液,离心后提取上清液,得到含内毒素的质粒上清液”,在所得到的含内毒素的质粒上清液中,质粒就被多聚磷酸保护着,这样在加入去内毒磁珠,对溶液中的内毒素进行吸附去除时,就可以减少因为在去内毒磁珠处理并吸附内...
6.一种去内毒素质粒提取方法,其特征在于:包括以下步骤: 步骤1),将菌体与菌体重悬液混合得细菌重悬液; 步骤2),加入菌体裂解液至细菌重悬液中,混匀,得细菌处理液; 步骤3),加入中和液至细菌处理液中,混匀,取上清液; 步骤4),加入结合液至上清液中,混匀,得混合液; 步骤5),将混合液转移至吸附柱,离心过滤,...
专利权项:1.一种低拷贝去内毒素质粒的制备方法,其特征是,包括以下步骤:第一步、将含有目标低拷贝质粒的细菌通过培养获得细菌培养液,离心收集细菌菌体;其中,细菌为大肠杆菌;目标低拷贝质粒含有多聚腺苷序列和或低拷贝复制子;离心条件为8000~9000rpm、5~6min、3℃~4℃;第二步、称重得到菌体的重量,按照重量体积比...
一种去内毒素质粒提取试剂盒及质粒提取的方法,该去内毒素质粒提取试剂盒至少包括菌体裂解试剂,杂质去除试剂,质粒回收试剂和内毒素去除试剂;按体积比,各个试剂的体积比例为:菌体裂解试剂的试剂一:菌体裂解试剂的试剂二:杂质去除试剂:质粒回收试剂:内毒素去除试剂的试剂A:内毒素去除试剂的试剂B=(10～30):(10～30)...
本发明涉及质粒提取领域,具体公开了一种去内毒素质粒提取用结合液及试剂盒及质粒提取方法.一种去内毒素质粒提取用结合液,包括溶剂,异硫氰酸胍,曲拉通X114,所述异硫氰酸胍在结合液中的摩尔浓度为25mol/L,所述曲拉通X114在结合液中的体积百分比为15%(V/V).本发明具有提高提取质粒的效率并且提高去内毒素的效果的优点...
5.一种根据权利要求4所述的去内毒素质粒提取试剂盒,其特征在于:所述去内毒素质粒提取试剂盒还包括菌体重悬液、菌体裂解液、中和液、去蛋白洗涤液、脱盐洗涤液、洗脱6.一种去内毒素质粒提取方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤1),将菌体与菌体重悬液混合得细菌重悬液;步骤2),加入菌体裂解液至细菌重悬液中,混...
一种提取质粒的试剂和方法 本发明提供了一种提取质粒的试剂和方法,它包括细菌裂解液,内毒素去除颗粒溶液,内毒素去除液,质粒结合液,洗涤液和洗脱液等试剂.利用本发明所述试剂和方法提取质粒,其操作步骤简单,提取所消耗的时间短,能有效降低所提取质粒中的内毒素含量,所提取的质粒中内... 林源吉,吕航 被引量: 0发...