蛋白质的沉淀 蛋白质的沉淀（protein precipitation），沉淀是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程。蛋白质从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。蛋白质沉淀常用的方法有盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、生物碱试剂与某些酸（如三氯醋酸）沉淀等。
蛋白质的沉淀方法主要有酒精沉淀法、酸沉淀法和盐沉淀法。 1.酒精沉淀法:将含有蛋白质的溶液中加入适量的冷酒精,使浓度达到70%-90%,静置一段时间后,可观察到蛋白质的沉淀。酒精沉淀法适用于分离较大分子量的蛋白质。 2.酸沉淀法:将含有蛋白质的溶液中加入适量的稀酸(如醋酸、盐酸等),使pH值下降到4以下,蛋...
蛋白质的沉淀的方法 1.酸性沉淀法:在酸性条件下,将蛋白质和特定的金属离子(如铜离子)配合形成不溶性的复合物沉淀。 2.盐析法:利用不同浓度的盐解离水合壳,使蛋白质沉淀。 3.醇沉淀法:在高浓度的乙醇或异丙醇中加入蛋白质,使其沉淀。 4.离子交换层析法:利用离子交换树脂对蛋白质进行分离纯化,蛋白质在不同...
l沉淀的类型 一、盐析法 (一)基本原理 蛋白质等生物大分子物质在水溶液中以一种亲水胶体形式存在,无外界影响时,呈稳定的分散状态(如图3-1)。其主要有两个原因:一.是蛋白质为两性物质,在一定pH条件下呈现一定的带电性,因而在水溶液中会因静电作用而相互排斥,从而保证了分散状态;二是蛋白质分子周围,水分子呈有...
蛋白纯化--蛋白沉淀 蛋白质在溶液中一般含量较低,需要经过沉淀浓缩,以利于进一步分离纯化。 1.有机溶剂沉淀蛋白质 丙酮、乙醇等有机溶剂可以使得蛋白质沉淀,再将其溶解在小体积溶剂中即可获得浓缩的蛋白质溶液。为保持蛋白质的结构和生物活性,需要在0-4℃低温下进行丙酮或乙醇沉淀,沉淀后应立即分离,否则蛋白质会...
蛋白发生沉淀的类型 蛋白质的水化膜遭到破坏或者中和了表面的净电荷后形成的沉淀往往是可逆的,这在蛋白盐析,蛋白等电沉淀中最为常见,利用这一特性也常用来分离纯化蛋白。这也可以理解为蛋白分子的物理状态发生了变化,这种聚集沉淀是可逆的。 蛋白分子在遭到剧烈的物理化学...
1.将待沉淀的蛋白质溶液加入适量的盐溶液中,使盐浓度达到蛋白质的盐饱和度。 2.静置一段时间,让蛋白质在高盐浓度下沉淀。 3.用离心机将混合物进行离心,将沉淀的蛋白质分离出来。 二、醋酸铵沉淀法。 醋酸铵沉淀法是另一种常用的蛋白质沉淀方法,它利用蛋白质在醋酸铵高浓度下沉淀的特性来实现分离。具体操作步骤...
等电点沉淀法是利用蛋白质在等电点时溶解度最低而各种蛋白质又具有不同等电点的特点进行分离的方法。 有机溶剂沉淀 有机溶剂能降低溶液的电解常数,从而增加蛋白质分子上不同电荷的引力,导致溶解度的降低;另外,有机溶剂与水的作用,能破坏蛋白质的水化膜,故蛋白质在一定浓度的有机溶剂中的溶解度差异而分离的方法...