双荧光素酶报告基因是指以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。 双荧光素酶报告基因测试:结合萤火虫和海洋腔肠荧光素酶先进的共报告基因测试技术在用萤火虫荧光素酶定量...
1. 在萤光素酶存在的条件下,萤光素+ATP生成萤光素化腺苷酸+ ADP。 2. 将萤光素化腺苷酸+氧气转化为氧化萤光素+AMP以及光。 萤火虫荧光素酶一般是作为主报告基因,将目的基因构建在该载体上,从而反应目的序列的作用结果,因此根据我们的实验目的,可以针对此质粒进行改造,载体的工作原理如下图所示: 海肾荧光素酶催...
实验背景与目的 01 荧光素酶报告基因技术简介 荧光素酶报告基因技术是一种灵敏、高效的基因表达检测方法。该技术利用荧光素酶与特定底物反应产生生物发光的原理，通过检测发光强度来反映目的基因的 表达水平。荧光素酶报告基因系统包括荧光素酶基因、启动子、目的基因和 荧光素酶底物等组成部分。实验目的和意义 验证目的...
该实验通过将荧光素酶作为报告基因与感兴趣的基因或蛋白质进行连接,从而达到检测和定量基因表达的目的。本文将探讨荧光素酶报告基因实验的原理、应用以及一些注意事项。 一、实验原理 荧光素酶(Luciferase)是一种源自萤火虫的酶类蛋白质,能催化荧光素(Luciferin)与氧气发生化学反应,产生可见光。实验中,荧光素酶基因被...
荧光素酶(Luciferase)是一种能够产生荧光的酶,通过将其与感兴趣的基因或启动子相连,可以实现对基因表达水平的定量检测。本文将介绍荧光素酶报告基因实验的基本原理、操作步骤以及实验注意事项。 首先,进行荧光素酶报告基因实验前,需要准备好所需的材料和试剂,包括质粒载体、荧光素酶底物、细胞培养基、转染试剂等。在...
报告基因:基因表达变化或者与基因表达变化相关的细胞事件的一个指示剂。通常是一种编码易被检测的蛋白质或酶的基因,其表达产物非常容易被鉴定。 荧光素酶(luciferase):一类能够产生生物发光信号的酶的统称,其中最有代表性的是从甲虫中分离得到的萤火虫荧光素酶和从海肾中分离得到的海肾荧光素酶。萤光素酶可以催化自身...
一、荧光素酶报告基因实验介绍 荧光素酶报告基因(luciferase)是指以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化荧光素氧化成氧化荧光素(oxyluciferin),在荧光素氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表...
报告基因/报告基团(reporter):是一种可被实验仪器非常方便检测到的化学基团、蛋白质或酶以及编码它们的基因。reporter可以通过实验手段非常容易被鉴定与检测,因此在实验中广泛应用。 例如,荧光素酶报告基因实验中运用的荧光素酶基因,以及qPCR中的荧光报告基团。
双荧光素酶报告基因实验 * 技术原理荧光素底物在荧光素酶作用下会发光,且光强度能反应荧光素酶的蛋白表达量。而荧光素酶的蛋白表达量,又和启动子活性、mRNA的稳定性及翻译效率等有关。利用这个特点,将待测启动子、UTR等序列与荧光素酶ORF框融合表达,再检测其发光强度,就能判断这些序列对蛋白表达的影响。这就叫...