荧光显微术的基本原理是利用荧光物质在受到特定波长的光照射后,会发出不同波长的光。这种现象被称为荧光。在荧光显微术中,通常使用一种特殊的光源,如激光,来激发样品中的荧光物质发光。然后通过显微镜的物镜收集发出的荧光,通过光学系统将其成像,从而得到样品的显微图像。 3. 重要参数指标 荧光显微术的重要参数指标主...
受激发射损耗(STED)荧光显微术是一种可以突破光学衍射极限的远场光学显微术。背景 随着科学技术的不断进步,生物医学,材料学领域开始对亚百纳米尺度的微结构进行观测与分析,从而对显微技术的发展提出了更高的要求。然而,由于衍射极限的存在,常规光学显微术的分辨率一般被限制在半波长左右,无法满足对于徽纳尺度观测...
此外,荧光显微镜在显微镜体系中有着重要的分类地位。按照光学系统划分,显微镜可分为复式光学显微镜和体视光学显微镜两大类,而复式光学显微镜又进一步包含正置和倒置显微镜。这些显微镜配备了不同的照明方式和观察方式,如明场、暗场、相差、荧光和微分干涉等,以满足各种观察需求。在荧光显微镜中,滤光片扮演着至关重要...
该技术利用宽场光源(如汞灯、LED或激光)对整个样本进行均匀照明,通过物镜收集荧光信号,并经过光学系统放大后,在相机或电荷耦合器件(CCD)上成像。与单点扫描的共聚焦显微镜相比,宽场荧光显微镜能够同时捕获视野内所有点的信息,因此具有更高的成像速度和更大的视野范围。### 二、发展历程宽场荧光显微成像技术的...
利用DMD 搭建的结构光照明荧光显微镜光路可以快速产生结构条纹,并进行精确控制,可实现生物样品的实时动态成像。DMD 利用反射原理产生结构光,它对宽光谱的入射光都具有较高的反射率,可以实现多波长激发。优势与发展 基于受激发射损耗荧光显微术(stimulated emission depletion,STED)和基于单分子开关的超高分辨率定位技术(...
然后,伴随背景的荧光涨落信号被显微系统的PSF卷积,并由传感器采样。在这一过程中,荧光信号的实际测量值将始终偏离SOFI所需的波动模型,使得原始图像中的信息利用率不高。故研究提出了自相关两步解卷积超分辨成像(SACD)方法(图1),首先对原始图像执行预解卷积,这...
荧光显微镜技术包括免疫荧光技术和荧光素直接标记技术。例如,将标记荧光素的纯化肌动蛋白显微注射入培养细胞中,可以看到肌动蛋白分子组装成肌动蛋白纤维。可将产生荧光的绿色荧光蛋白(green fluorescent,GFP)基因与某种蛋白质基因融合,在表达这种融合蛋白的细胞中,便可直接在活体状态下观察到该蛋白在活细胞内的动态...
最常见的荧光显微成像技术就是传统的宽场荧光显微镜,但它只能对事先切片的样品进行成像,不具备光学切片能力,对于厚度大于2微米的三维样品,宽场照明会使得整个样品体积内的荧光标记发射荧光,这些离焦光会遮掩焦面上的细节从而极大降低了对比度。 3.2 结构光照明显微成像技术 宽场荧光显微镜低对比度的问题可以通过在系统...
基因测序荧光显微系统利用荧光显微成像技术在短时间内能够获得大量基因碱基的荧光标记信号,完成对大量样本的快速检测,结合图像数据分析可以实现高效基因测序。基因测序荧光显微系统目前已经成为获取生物信息、疾病诊断的有力工具,被广泛应用于人类健康、疾病防...