摘要 [目的]提高MTG产量并实现简便有效的纯化过程,以枯草芽孢杆菌为宿主构建pMA5mtg重组质粒。 [方法]通过提取茂源链霉菌的基因组DNA,扩增mtg基因片段,再将异源信号肽与 mtg 基因片段进行融合,融合片段和pMA5质粒双酶切后连接,转化到大肠杆菌感受态细胞中,菌落PCR和测序获得阳性单克隆。然后将pMA5mtg重组质粒转入...
摘要:[目的]提高MTG产量并实现简便有效的纯化过程,以枯草芽孢杆菌为宿主构建pMA5mtg重组质粒。[方法]通过提取茂源链霉菌的基因组DNA,扩增mtg基因片段,再将异源信号肽与mtg基因片段进行融合,融合片段和pMA5质粒双酶切后连接,转化到大肠杆菌感受态细胞中,菌落PCR和测序获得阳性单克隆。然后将pMA5mtg重组质粒转入枯草芽...
本发明公开了一种促进产谷氨酰胺转胺酶的茂源链霉菌快速生长的培养基,其组分及质量体积比为:可溶性淀粉16~24g/L、KNO30.8~1.2g/L、MgSO4·7H2O0.4~0.6g/L、K2HPO4·3H2O 0.4~0.6g/L、NaCl 0.4~0.6g/L、FeSO4·7H2O0.008~0.012g/L、碱性氨基酸0.1~2g/L,琼脂20g/L,pH值6~8。本发明采用产谷...
茂源链霉菌(Streptoverticillium mobaraensis)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)均購自中国微生物菌种保藏中心,再由合肥工业大学分子生物学实验室培养保存。载体构建所用质粒pMA5,大肠杆菌DH5α。 1.1.2主要试剂。 EasyPure Bacteria Genomic DNA Kit(TransGen),EasyPure Plasmid MiniPrep Kit(TransGen),EasyPure PCR ...
以茂源链霉菌为出发菌株,在单因素实验基础上,选择初始p H、转速、装液量和培养温度为主要影响因子,应用响应面Box-Behnken设计进行4因素3水平实验,...
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进一步优选地,本发明所述促进产谷氨酰胺转胺酶的茂源链霉菌快速生长的培养基,其组成成分及质量体积比为: 可溶性淀粉20g/l、kno31g/l、mgso4·7h2o0.5g/l、k2hpo4·3h2o0.5g/l、nacl0.5g/l、feso4·7h2o0.01g/l、琼脂20g/l,精氨酸或赖氨酸或组氨酸为0.5g/l,ph值7.4。
[目的]提高MTG产量并实现简便有效的纯化过程,以枯草芽孢杆菌为宿主构建pMA5_(mtg)重组质粒。[方法]通过提取茂源链霉菌的基因组DNA,扩增mtg基因片段,再将异源信号肽与mtg基因片段进行融合,融合片段和pMA5质粒双酶切后连接,转化到大肠杆菌感受态细胞中,菌落PCR和测序获得阳性单克隆。然后将pMA5_(mtg)重组质粒转入枯...
[目的]提高MTG产量并实现简便有效的纯化过程,以枯草芽孢杆菌为宿主构建pMA5mtg重组质粒.[方法]通过提取茂源链霉菌的基因组DNA,扩增mtg基因片段,再将异源信号肽与mtg基因片段进行融合,融合片段和pMA5质粒双酶切后连接,转化到大肠杆菌感受态细胞中,菌落PCR和测序获得阳性单克隆.然后将pMA5mtg重组质粒转入枯草芽孢杆菌...