也称考马斯蓝染色法(coomassie blue staining)又称Bradford法,是 Bradford 于 1976 年建立起来的一种蛋白质浓度的测定方法。由于其突出的优点,正得到越来越广泛的应用。方法简介 考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;...
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考马斯亮蓝染色又称Bradford法,是 Bradford 于 1976 年建立起来的一种蛋白质浓度的测定方法(【Western-Blotting】蛋白提取与蛋白定量)。 考马斯亮蓝染色有G250和R250两种,在酸性条件下,R250和G250可与蛋白质中的精氨酸、赖氨酸和组氨酸(arginine, lysine and histidine)结合; ...
考马斯亮蓝染色是用考马斯亮蓝进行蛋白质染色的方法。考马斯亮蓝是一种阴离子染料,常用考马斯亮蓝G250和R250。考马斯亮蓝G250在游离状态下呈红色,当它与蛋白质通过疏水结合后变为蓝色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。方法简介 考马...
考马斯亮蓝脱色剂是一种阴离子染色剂,它能够与蛋白质发生非共价键结合,形成考马斯亮蓝-蛋白质复合物。当复合物与脱色剂(如甲醇、醋酸、异丙醇等)接触时,复合物会发生结构改变,从而使蛋白质失去染色性。 二、用途 考马斯亮蓝脱色剂广泛应用于生物学实验中。它可用于凝胶电泳检测蛋白质、核酸、多肽等...
它利用亮蓝G-250与蛋白质之间的相互作用,使蛋白质呈现出蓝色,从而可以在凝胶中可视化蛋白质。2.分类:考马斯亮蓝染色主要有两种类型:快速染色和传统染色。快速染色可以在1-2小时内完成,但灵敏度较低;传统染色需要更长的时间(通常一夜),但灵敏度更高。3.实验步骤:(1) 蛋白质电泳:首先,将蛋白质样本通过SDS-PAGE...
首先,考马斯亮蓝原理是由奥地利物理学家弗朗茨·考马斯和奥托·弗里德里希·马斯于1921年提出的。他们发现,当将某些物质暴露在特定波长的光线下,这些物质会吸收能量,并在受激发后发出特定波长的光。这种发光现象被称为考马斯亮蓝效应。 其次,考马斯亮蓝原理的实现需要两个基本条件,第一,物质本身具有发光的性质,即能...
Bradford 法又称考马斯亮蓝法,用于快速,简便的蛋白质定量。这种定量方法在室温进行,无需特殊仪器。将配制好的考马斯亮蓝 G-250 检测试剂加入标准品和待测样品中,经过短暂的室温孵育即可在 595 nm 处测定吸光值。Bradford 法蛋白定量与蛋白质样品中常见的盐离子、溶剂、缓冲液、硫醇、还原性物质...