吸去多余水分,加上荧光封片液,以防止荧光淬灭,并盖上盖玻片。 观察与拍照:在荧光显微镜下观察染色结果,并拍摄照片。FITC标记的鬼笔环肽会发出绿色荧光,显示微丝在细胞中的分布;DAPI则发出蓝色荧光,标记细胞核的位置。 染色示例 通过细胞鬼笔环肽染色,研究者可以看到细胞骨架中微丝形成的网络结构,这些微丝在细胞内呈现出...
PBS清洗细胞2次,每次10分钟;3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分钟,PBS清洗细胞2次;加入5ug/ml的FITC-鬼笔环肽室温染色30-60分钟,夏季时间可以短一些,PBS清洗细胞2次;DAPI或hoechst33258染细胞核10分钟,PBS清洗细胞2次;吸去多余水分,加荧光封片液(中性或偏碱性缓冲液加等量甘油),盖上盖玻片,荧光或共聚焦显微镜下...
鬼笔环肽-细胞骨架染色『实验方案』。方案如图,开展实验前,应确认显微镜🔬的激光波段,而后进行购买,想好每一步操作所需要的条件,是否无菌,是否避光,玻片是否保湿等实验难点: 1:区分无菌操作 固定细胞前的步骤,都要无菌 2:区分 - 小张192(科研版)于2024
3)细胞透化:固定后,用0.5%TritonX-100作透化剂,室温静置约5min,它可削弱细胞膜屏障,助鬼笔环肽入细胞,之后用PBS洗涤细胞。 3)鬼笔环肽染色:向细胞加荧光标记鬼笔环肽溶液,室温孵育20-30min,使其与F-actin精准、特异性结合,利于观察细胞骨架。 4)洗涤与封片:染色后,用PBS缓冲液多次冲洗细胞,去除多余鬼笔环肽;...
在荧光显微镜下观察,细胞骨架结构清晰,可见荧光偶氮染料和溴化乙酰显色的微丝、中间丝和微管纤维。 四、实验结论 通过本实验,我们知道细胞骨架是由微丝、中间丝和微管等纤维蛋白质组成的一种网状结构,主要作用是支撑细胞的形态,参与细胞的运动和分裂等生命活动。通过细胞骨架的染色与观察,可以了解细胞骨架的结构和特点。
实验方法原理细胞骨架微管的主要成分主要为管蛋白(Tublin),用免疫荧光法能显出其清晰结构。 实验材料 细胞 试剂、试剂盒 PBS丙酮甲醛 仪器、耗材 碟皿恒温箱 实验步骤 1. 细胞培养 用支持物细胞培养法,把细胞培养在小盖片上; 2. 漂洗 用镊子挟出小盖片,在温PBS中漂洗3 次,每次30 秒; ...
视频加载失败,可以 刷新 试试 00:00/00:00 评论 还没有人评论过,快来抢首评 发布 细胞骨架染色!鬼笔环肽染色具体实验步骤 爱必信生物 发布于:上海市 2024.08.13 16:32 +1 首赞 收藏 细胞骨架染色!鬼笔环肽染色具体实验步骤 推荐视频 已经到底了 热门视频 已经到底了 ...
荧光染色观察一实验目的1掌握细胞骨架的显示方法2掌握荧光显微镜的使用方法3了解荧光显微镜下细胞骨架的基本形态结构4了解荧光探针hoechst33342ho33324与细胞成分的结合特性和光谱特性二实验原理1微丝股价是一种高度动态的三维网状结构与细胞的多种生理活动如细胞运动胞质分离细胞器的定位细胞内物质的运输吞噬作用细胞极性生长...
图一:CHO细胞微丝荧光染色图 图二:CHO细胞细胞核荧光染色图 图三:CHO细胞微丝与细胞核荧光染色叠加图 六、实验结果分析 染色后微丝呈绿色,细胞核为蓝色,染色较为清晰。但细胞数量较多,导致有些染色结果重叠。 七、思考题 1、PEM缓冲液的作用是什么? 细胞内的微丝在含有ATP和Ca2+及低浓度的Na+,K+等阳离子溶液...
实验六 考马斯亮蓝染色显示细胞骨架 一、实验目的 1、了解细胞骨架成分显示方法的原理 和操作步骤；2、观察微丝在细胞中的分布。二、实验原理 考马斯亮蓝R250(CoomassieblueR250)是一种蛋白质染料，能非特异地显示细胞骨架蛋白。用含去垢剂TritonX-100的缓冲液处理细胞，可将细胞的膜结构和部分蛋白质抽提...