实验流程和操作步骤 01实验分组(每组建议3-6个复孔)实验组:药物或者基因过表达等处理细胞+CCK-8试剂(见下表黄色列)对照组:不加药物等的对照细胞+CCK-8试剂(见下表绿色列)空白组:不加细胞的空白培养基+CCK-8试剂(见下表蓝色列)PBS孔:灰色,防止液体过度蒸发排版参考:02实验方案 1.种板细胞数:细...
CCK-8: (Cell Counting Kit-8),是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂。 基本原理:CCK-8试剂中含有WST-8,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物,生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。细胞增殖越多越快,颜色...
在实验过程中,我们使用新鲜的完全培养基来稀释cck8,并确保充分混匀。接着,将待测孔中原有的培养基吸走,随后加入预先配制好的含有cck8的培养基,整个操作过程中需注意避光。在加入含有cck8的培养基时,我们需确保枪尖紧贴孔内壁,缓慢加入,以防止产生气泡。6. 在进行每次测定时,务必在同一块板上设置调零孔。...
CCK-8法目前是生命科学研究中检测细胞增殖和毒性应用最广泛的方法之一,截至2022年,在Pubmed数据库中利用CCK-8试剂发表的文献数逐年递增。 实验原理 细胞增殖的检测方法众多,CCK-8是细胞增殖检测中的代谢活性检测,属于MTT的升级产品,操作较MTT更便捷(不需要DMSO溶解)。 工作原理:CCK-8可以被细胞线粒体内的脱氢酶还...
包括细胞接种密度、药物处理时间与浓度以及CCK-8试剂的添加。使用多孔板阅读器进行读数时,应注意避免边缘效应,即边缘孔的读数可能因蒸发等原因而偏高或偏低。(为减少这种情况的发生,最好在检测孔周围铺设一圈无菌水或PBS,减少检测孔的液体蒸发。笔者亲测非常有效!)问题二:背景值过高 解决方案在添加CCK-8试剂前...
CCK-8是一种高灵敏度、无放射性的比色检测法,用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数量,可替代传统的MTT法,常应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。尽管有人戏称CCK-8测细胞增殖实验只要有试剂盒就“有手就行”,但实际操作中仍有许多细节需要注意。本期细胞学堂将详细介绍CCK-8法的原理、...
英文名称 CCK-8 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit 别名 CCK-8 WST-8 储存条件 4℃密封避光保存 交易保障 买家保障 卖家承诺履约合规诈骗保赔,保障商品交易安全 价格说明 价格:商品在爱采购的展示标价,具体的成交价格可能因商品参加活动等情况发生变化,也可能随着购买数量不同或所选规格不同而发生...
细胞活性检测是使用CCK-8试剂盒的关键步骤。按照标准操作流程,将适量CCK-8试剂加入待测细胞中,孵育一段时间后,通过酶标仪测定吸光度,即可评估细胞的增殖与活性状态。在96孔板中,以100μL/孔的细胞悬液进行接种,建议设立8个不同的细胞浓度梯度,并在每个浓度下设置6个重复孔。例如,可以按照0/35/625/1250/...
1. CCK8使用前在室温下解冻并离心。 2. 用倒置显微镜检测细胞生长状态,并用4X/10X取生长状态良好,细胞分布及密度均一的孔拍照记录。 3. 在每孔中加入10μL的CCK-8溶液。 4. 在37℃、5% CO2、90%湿度条件下培养0.5-4小时。 5. 用酶标仪在450 nm处测量吸光度。