在凋亡早期,PS会从细胞膜内侧翻转到外侧,与Annexin V结合。通过流式细胞仪检测Annexin V的结合情况,可以判断细胞的凋亡状态。试剂与步骤: 使用试剂:eBioscience流式凋亡试剂盒、PBS等。 样本处理:消化收集细胞后,用PBS洗一次,加入RNaseA去除RNA,再加入Pl染色。 上机检测:调整电压和阈值,一般检测1万个细胞左右。 实...
未染色组(未进行任何染色的细胞,用于确定细胞的自发荧光水平) ②制备单细胞悬液: 与上述细胞周期收集单细胞悬液操作相同。 ③凋亡检测的染色(FITC/PI双染试剂盒): 1)将细胞悬浮于500μL 1X Binding Buffer中,均匀分装4到个离心管中(每管1 X 106细胞),包括未染色管、FITC单阳管、PI单阳管,FITC_PI双阳管。
细胞周期和凋亡实验细胞周期实验 (1)收集对数生长期细胞:弃除旧培养基,用PBS洗涤细胞加入适量胰酶进行消化。加入新鲜的培养基吹打细胞,并将细胞收集于标记好的对应离心管中,室温1000 rpm离心5 min,弃除上清液。 (2)洗涤细胞:用预冷的PBS重悬上述细胞沉淀,室温1000 rpm离心5 min, 将上清液弃除。 (3)固定细胞:...
流式检测细胞周期和凋亡实验步骤 流式细胞技术检测细胞周期分布 1) 已转染miRNA mimics的细胞培养达到85%融合时,用胰酶消化细胞。1000 rpm,离心5min,收集细胞沉淀; 2) 已消毒的PBS重悬细胞,1000 rpm/min,离心5 min,收集细胞。重复此步骤2次,以除去胰酶; 3) 加入预冷的70%乙醇固定细胞过夜; 4) 第二天1000...
流式细胞仪操作流程 向阳的孟 59190 06:22 流式细胞实验之调补偿 流式细胞马老师 64001 【流式细胞术】细胞周期实验步骤实操演示。本视频包括流式细胞术细胞周期样本处理所需试剂,仪器以及详细实验操作步骤 实验加油站 49:01 如何使用FlowJo分析凋亡、周期和增殖 ...
2.3、100μl 1×binding buffer重悬细胞,每个样本加入5μl AnnexinV和PI染色液,轻轻混匀后室温避光孵育15min; 2.4、1000rpm常温离心5min,去除上清,加入500μl PBS重悬细胞,立刻上流式细胞仪检测。 图A 细胞周期检测图;B 细胞凋亡检测图
细胞功能检测主要包括:细胞周期、细胞增殖,凋亡等。 细胞周期 细胞的生命开始于产生它的母细胞的分裂, 结束于它的子细胞的形成,或是细胞的自身死亡。细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,分为间期与分裂期两个阶段。 (一) 间期 1. G1期(first gap)从有丝分裂到DNA...
不同时间点以CCK一8检测细胞增殖活力.流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期的变化。结果 不同浓度丹参酮IIA干预和不同时间干预.对瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖活性、早期凋亡率、细胞周期GO/G1期比例的影响,均具有统计学意义(P固.001)。其中200“咖L组干预效果最明显。结论丹... ...
祁连圆柏对人胃癌细胞SGC-7901细胞周期和凋亡影响的实验研究
细胞周期,是指能持续分裂的真核细胞从一次有丝分裂结束后生长,再到下一次分裂结束的循环过程。细胞周期的长短反映了细胞所处状态,这是一个细胞物质积累与细胞分裂的循环过程。癌变的细胞以及特定阶段的胚胎细胞常常有异常的分裂周期。目前细胞周期和凋亡检测的一般是通过流式细胞仪检测。 详情介绍 一、服务介绍通过流...