1.了解血清蛋白质分离的一般方法2.掌握盐析法、凝胶层析分离纯化白蛋白的方法 实验原理 血清中主要蛋白：白蛋白与球蛋白 正常人血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白的量保 持相对恒定；总蛋白60-80克/升，白蛋白为40- 50克/升，球蛋白为20-30克/升。盐析法 中性盐类能破坏溶液中蛋白分子表面的双电子...
最后经离子交换层析纯化目标蛋白,利用蛋白质的pl,选择合适的pH缓冲溶液,改变溶液的离子强度,以使目标蛋白杂质白分开,经脱盐的样品溶解在0.025mol/L醋酸缓冲溶液中,加到二乙基氨基乙基纤维素层析柱上。在此pH时,DEAE纤维素带有正电荷,能吸附带负电荷的白蛋白。而y-球蛋白带正电荷,不被吸附故直接流出,此时收集所得...
人体内的人血清白蛋白(HSA)可以运输脂肪酸,胆色素,氨基酸,类固醇,金属离子,以及多种治疗因子,并保持血液的正常渗透压。人血清白蛋白(HSA)在临床上主要用于治疗休克和烧伤,主要是由于手术、意外事故、大出血引起的失血,也可以用作血浆增容剂。 当前在市场上出售的 HSA产品均来自于人体血液的提纯,但人类血液的资源十分...
血清白蛋白分离与纯化实验目的1.了解血清蛋白质分离的一般方法2.掌握盐析法、凝胶层析分离纯化白蛋白的方法实验原理血清中主要蛋白:白蛋白与球蛋白正常人血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白的量保持相对恒定;总蛋白60-80克/升,白蛋白为40-50克/升,球蛋白为20-30克/升。盐析法中性盐类能破坏溶液中蛋白分子表面的双电子...
18实验一血清白蛋白的分离、纯化与鉴定???综合性实验???18实验二血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳???20实验三聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE???21实验四核酸的提取和鉴定???24实验五影响酶活性的因素???27实验六琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制???30实验七乳酸脱氢酶及辅酶Ⅰ???
白蛋白白蛋白 离子交换层析基本原理离子交换层析基本原理 n根据待分离物质带电性质不同的分离纯化 方法 n以离子交换剂为固定相,特定的离子溶液 为流动相,依据各种离子或离子化合物与 离子交换剂的结合力不同进行分离纯化的 层析方式 离子交换剂离子交换剂 离子交换剂由基质、电荷基团(或称功能基团)和反离 子组成。
掌握牛血清白蛋白分离纯化各步骤(分段盐析、离子交换层析)原理及操作方法。 【实验原理】 盐析法是一种利用蛋白质在不同浓度盐溶液中溶解度不同而分离的方法。通过将盐类加入到蛋白质溶液中,使蛋白质表面电荷被中和,水化膜被破坏,导致蛋白质在水溶液中的稳定性因素去除而沉淀。分段改变盐类浓度达到分离目的的方法叫分...
一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血细胞与血清分离: 取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞,上部为血清).2. 乳糜粒分离:4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心梯度液配置:离心管下部3/4容积加血浆,上部1/4容积加0.5MnaCl+0.3MEDTA,PH7.4 乳糜粒上浮,将乳糜粒...
1.本发明属于生物技术领域,具体涉及一种人血清中白蛋白分离纯化方法。 背景技术: 2.常用白蛋白纯化方法按照大类分可以分为较传统的沉淀法和新技术发展而来层析 色谱法。无论哪种方法,其分离纯化的原理都是利用其物理和化学性质的差异。沉淀 法是通过沉淀的方式来实现目标蛋白与杂质的分离,具有成本低、操作简单、回...
掌握血清白蛋白分离纯化的方法; 学会用盐析和离子交换柱层析法分离 纯化蛋白质的原理与操作; 掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋 白质分子量的原理和方法。 血清的制备 留样:1 原理与操作 留样:2,3 白蛋白的初步分离 留样:4,… 白蛋白的纯化 白蛋白的相对分 子质量的测定 pI Mr 白蛋白 α1-球蛋白 α2-球蛋...