疏水相互作用层析是根据蛋白表面疏水性的不同，利用蛋白和疏水层析介质疏水表面可逆的相互作用来分离蛋白的方法。原理 疏水作用色谱（Hydrophobic Interaction Chromatography, HIC）是根据分子表面疏水性差别来分离蛋白质和多肽等生物大分子的一种较为常用的方法。蛋白质和多肽等生物大分子的表面常常暴露着一些疏水性基团，...
在疏水纯化的过程中,改变蛋白质疏水性能最常用的方法就是改变溶剂中的离子强度,例如在上样的过程中,通过增加盐浓度以提高缓冲液中的离子强度,使蛋白质暴露更多的疏水基团,与偶联了疏水基团的填料相结合;在洗杂或洗脱的过程中,降低盐浓度(即离子强度)后,蛋白表面的疏水区域减少,逐步从填料表面解吸。 疏水层析应用场...
疏水层析，作为蛋白质分离工艺中的一环，凭借其独特的纯化方式，在生物制药领域占据着举足轻重的地位。它依赖于层析介质与蛋白质分子间的疏水作用，实现高效吸附与分离。其“高盐吸附、低盐洗脱”的特性，使得在多步纯化过程中能够优化工艺流程，不仅提高了纯化效率，还降低了生产成本。疏水层析实验设计要点 配基的选择 ...
它的核心原理是利用样品中不同组分与疏水填料表面相互作用的强弱差异,通过改变缓冲液条件控制结合与洗脱,最终达到分离目标物的目的。 疏水层析的操作流程分为平衡、上样、洗脱、再生四个环节。平衡阶段用高盐缓冲液让填料表面形成疏水环境,方便目标物结合。上样时样品中的疏水物质与填料结合,杂质随流动相流出。洗脱阶段...
疏水层析是利用蛋白质在高盐条件下吸附在疏水层析介质的疏水基团上，降低盐浓度时，不同蛋白按疏水性从弱到强依次被洗脱，从而达到分离纯化的目的。与亲和层析、离子交换层析相比，疏水层析在分离过程中，分离介质与蛋白质分子之间的相互作用力较弱，蛋白质在层析分离中不易发生分子结构的激烈改变，不易丧失活性，因此其...
“疏水作用”一词是Kauzmann于1959年首次在“蛋白质进展”杂志中提出的,随后陆续有学者发表用疏水层析成功分离蛋白质的文献报道；如钙调蛋白、苯丙氨酸裂解酶、凝集素等。1972年,ErelZ.等人将不同链长的α,ω—二胺同系物键合在琼脂糖上,以不同pH的含盐缓冲液作流动相成功纯化了糖原磷酸化酶,开始确立了疏水层析在...
疏水吸附层析的基本材料是疏水吸附剂。疏水吸附剂是由球状的载体与疏水基团共价结合而成的。在疏水吸附剂颗粒的表面上，分布着许多的疏水基团。在球状蛋白质分子的表面上，有疏水区和疏水口袋。它是由一些疏水氨基酸残基的疏水基团构成的。将悬浮于吸附缓冲液的疏水吸附剂装进层析柱内，构成柱床，然后，将溶于吸附缓冲...
进行疏水层析时,合理的流程是:( ) A. 有机溶剂上柱,低盐洗脱,高盐洗脱 B. 低盐上柱,高盐洗脱,低盐洗脱 C. 高盐上柱,低盐洗脱,有机溶剂洗脱 D.
疏水层析也称疏水作用下层析（hydrophobic interaction chromatography HIC）从分离纯化生命物质的机制来看，也属于吸附层析一类。疏水层析和反相层析（reversed phase chromatography）分离生命物质的依据是一致的，利用固定相载体上偶联的疏水性配基与流动相中的一些疏水分子发生可逆性结合而进行分离。该方法基于的是蛋白质的疏水...