现在在准备透射电镜的样品，传代培养的HepG2细胞，在10cm皿培养后，固定收集，然后做超薄切片。在操作过程中遇到一些细节上的问题，还请各位朋友多多赐教。1，固定液的量。PBS润洗后，我向10cm平皿内加入5ml固定液，这个量合适吗？2，刮除细胞的时候需不需要将固定液全部吸除再刮？手头只有一个大致的步骤：4度固定30min后用
这个难题很大程度上是由透射电镜的高电压与制样中的染色/负染步骤导致的。生物样品一般由C、H、O、N等原子序数较低的“轻质”元素组成,在传统透射电子显微镜高达120kV的高能电子束轰击下,很快就会被击穿甚至灰飞烟灭,不能留下任何图像。也就是说生物样品在传统的透射电镜成像中太过于“脆弱”,需要给这些样品穿上...