液体流动相中被分析试样在经过色谱柱内固定相时,各组分得到有效分离,再经检测系统和记录系统可得测定结果和色谱图。固定相可以是固体,也可以是涂渍在固体表面的液体。前者称液固色谱,后者称液液色谱。高效液相色谱分析则采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相,具有分离效能高、选择性好、灵敏度高和分析...
液相色谱法就是用液体作为流动相的色谱法。1906 年俄国植物学家茨维特（M.S.Tswett）将植物色素提取液加到装有碳酸钙微粒的玻璃柱子上部，继而以石油醚淋洗柱子，结果使不同的色素在柱中得到分离而形成不同颜色的谱带，每个色带代表不同的色素。从此，这类方法均称为色谱法。随着色谱技术的发展，色谱法不仅可以...
确定色谱柱、流速、柱温 实验室分析中最常用的就是类型的色谱柱,一般为5μm0.46×250mm或者是0.46×150mm,在试验前期如果在没有参考资料的情况下,首选最为普通的 5μm0.46×250mm的色谱柱试一下;如果发现用5μm0.46×250mm的色谱柱去分离多种杂质时,有分叉峰出现或是理论塔板数比较低时则提示我们这种类型的...
产生原因:样品进入高效液相色谱中,当溶剂与流动相存在差异时,一部分样品溶解进入了流动相,一部分还留在溶剂里造成色谱保留的差异。造成这种差异的原因主要有溶剂强度、进样体积、流动相与溶剂的兼容性、溶剂pH等。 进样体积导致的溶剂效应:使用强度大于该样品出峰时流动相强度的溶剂,增加进样体积后,目标分析物色谱峰...
高效液相色谱仪原理 空心梦 高效液相色谱仪原理 高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谱的理论,把原来的流动性改变为最高压力可达到4.9′107Pa。色谱柱则是用特殊的方式用小颗粒装填而成。造成的结果… 阅读全文 色谱分析法内标法与外标法的区别?
关于高效液相首选等度洗脱,流动相比例越简单越好,能不用缓冲盐就不用,洗脱方法越简单越好、色谱柱越常见越好,但是有的时候用单一比例的流动相或者是常见色谱柱是无法满足很多杂质的分离,这时就需重新开发色谱分离方式。下面为一些分析条件开发的个人的经验,希望给新入行的朋友一些实验灵感。
特点:考虑了杂质与主成分响应因子可能不同所引起的测量误差。 参考资料: [1]中国药典(2020版) [2]丛浦珠等,分析化学手册 [3]岛津液相色谱仪资料 来自:书生遗失毋尘>《工具》
高效液相色谱中通常使用的检测器均为紫外荧光检测器等选择性检测器,它们对不同结构化合物的响应值差别较大,有时甚至可以相差几个数量级,对成分复杂的样品分析而言,采用归一化法定量显然不可行。示差折光或蒸发光散射(ELS)检测器等通用型检测器对许多化合物有相似的响应,因此可以采用峰面积归一化法定量。只含有UV响应...
1. 样品前处理：对于液相色谱分析，需要将样品进行适当的预处理。这可能包括样品的萃取、过滤、浓缩、蛋白质沉淀等步骤，以去除干扰物质或提高分析的准确性。2. 样品进样：处理后的样品被注入液相色谱仪的进样器中，通过进样针将样品引入色谱柱。进样量应精确控制，以确保样品的均匀性和稳定性。3. 流动相：液相...