FSC和/或SSC参数又派上用场了。 1 FSC-A vs. FSC-H作图, 选出单细胞。 2 FSC-W vs. FSC-H作图, 选出单细胞。 “小白”粉 FSC-A vs. FSC-H和FSC-W vs. FSC-H做的图不一样啊,哪一种比较好?其实除了这两种,还有用SSC-A vs. SSC-H或者SSC-W vs. SSC-H作图去除双联体细胞的。有选择障碍...
fsc代表的是forward scatter，这个参数和细胞的大小成正比，A是area的缩写，H是height的缩写。这是机器在记录信号时所采用的参数（不显示在用户界面，在调试机器的时候可以显示）每个细胞通过激光的时候，机器都会记录一个波状信号（一个拱形的信号），H就是这个拱的高度（代表的是信号的强度），A就是这个...
● FSC-SSC的作用：利用细胞大小和颗粒度初步区分细胞群、去除细胞碎片、去除黏连细胞。从细胞进入激光照射区到离开，产生一个电脉冲信号。H是脉冲高度，代表脉冲信号的峰值；W是脉冲宽度，是指细胞通过激光照射区域的时间；A是脉冲信号的面积。实际操作中，部分细胞与细胞会粘在一起，连续通过激光照射区，被仪器认定...
一般检测那个通道的荧光就是选择哪个-H,比如FSC-H,SSC-H,FL1-H等等流式涉及的调节参数太多了,主要的有: 1.电压 2.阈值 3.荧光补偿 4.通道选择:需要哪些通道、选择面积/高度/宽度、线性/Log 5.停止条件选择太多太多了 FL2-A代表FL2 AREA,FL2-H即FL2 HEIGHT,通过这两个参数,可以将粘连体排除出去,因为...
2.细胞刺激(6-7 h) (1)在96孔板盖上做好组别标记,每孔加入100 μL细胞悬液。在特定孔中加入100 μL肽阴性和阳性对照混合物,并用多通道移液枪轻轻混匀细胞。 (2)置于37℃,5%CO2条件下刺激培养6 h(刺激结束后,置于冰箱中可存放18 h...
在分析软件中建立FSC-H/SSC-H散点图,取1管酵母悬液进行上样,调整并确定流式细胞仪的前向角散射光(FSC)和侧向角散射光(SSC)基本参数,FSC采用Line线性形式,SSC采用Log对数形式,在FSC-H/SSC-H散点图上圈定酵母范围;每个样品上样1min,根据圈定的酵母范围,分析酵母个数占总颗粒数的比例,计算1min读取到的酵母个...
3. FL2-W FL2-A FL2-H : 流式细胞仪检测信号时,每一个细胞通过激光,机器的探头都会检测到一个荧光信号,在内部产生一个电脉冲信号(波),这个信号机器记录为一个峰值,每一个峰值都有三个参数,高度(H),宽度(W)和曲线下面积(A),H 和W都是直接测出的,而A是根据机器的设置就算得出。
图1 SSC-H vs. FL1-H双参数散点图Fig.1 Dot plots of side scatter vs. green fluorescence “门”R1内为加入的微球,“门”R2内为待测的病毒.根据R1/R2可以推算出样品病毒的滴度(1). (1) 将得到的样品病毒滴度乘以稀释倍数便是原病毒样本中的病毒滴度. 1.5 重复性和线性性检测 线性性:PBS缓冲液稀释...
● 侧向散射光(side scatter):SSC信号的强弱与细胞内的颗粒多少相关; ● FSC-SSC的作用:利用细胞大小和颗粒度初步区分细胞群、去除细胞碎片、去除黏连细胞。 从细胞进入激光照射区到离开,产生一个电脉冲信号。H是脉冲高度,代表脉冲信号的峰值;W是脉冲宽度,是指细胞通过激光照射区域的时间;A是脉冲信号的面积。
●FSC-SSC的作用:利用细胞大小和颗粒度初步区分细胞群、去除细胞碎片、去除黏连细胞。 从细胞进入激光照射区到离开,产生一个电脉冲信号。H是脉冲高度,代表脉冲信号的峰值;W是脉冲宽度,是指细胞通过激光照射区域的时间;A是脉冲信号的面积。 实际操作中,部分细胞与细胞会粘在一起,连续通过激光照射区,被仪器认定为一次...