问题1，GS115能不能用化学转化方法，用氯化锂处理细胞制成感受态，然后用鲑精NDA 试剂进行转化 2，我用的载体是pPIC9k，能否以非线性的状态进行化学转化？若转化的质粒必须是线性的，那么化学转化方法可以转化线性的DNA么？我也刚开始做 可以回答你第七个问题 酵母是可以用菌落做PCR的，但之前要提前做破壁处理，处理之后可以直接PCR 检测。
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摘要:采用电转化法将已构建好的表达载体pPIC9K—GT转化到毕赤酵母(Pichinapastoris)GS115中。通过 对电转化条件进行优化,达到了理想的转化效率,得到了大量转化子,并通过表型筛选及PCR鉴定,筛选到阳性转 化子。对重组的PpastorisGS115一GT进行了诱导表达,用SDS—PAGE法检测到目的蛋白质条带,证明p一1,4-半乳 ...
上传人:60524d9r39woib4xduflsp_majia2015-02-18
糖化酶是将淀粉转化为葡萄糖的酶。大部分野生酵母菌因缺乏糖化酶基因而不能直接利用淀粉。研究人员将经诱变处理获取的黑曲霉菌高产糖化酶基因导入毕赤酵母GS115中,构建能直接利用淀粉的工程菌,该过程所用质粒(仅示部分结构)如图1所示。请回答下列问题。 (1)为获得糖化酶高产菌株,研究人员将经诱变处理后的黑曲霉菌...
糖化酶是将淀粉转化为葡萄糖的酶,大部分野生酵母菌因缺乏糖化酶基因而不能直接利用淀粉。研究人员将经诱变处理后获取的黑曲霉菌高产糖化酶基因导入毕赤酵母GS115(对氨苄青霉素不敏感)中,构建能直接利用淀粉的工程菌,该过程所用质粒的部分结构如图1所示。三种限制酶的识别序列及切割位点见下表。请回答下列问题:...