核酸分子杂交是指两条具有互补序列的核酸单链在一定条件下按碱基配对的原则形成双链的过程,杂交后形成的异源双链分子称为杂交分子或杂交双链,杂交的双方是探针与待检测序列。 利用DNA变性与复性的基本性质,分子杂交技术结合印迹技术和探针技术,目的是为了进行DNA/RNA定性或定量的分析。 一、印迹技术 在杂交反应前,常...
核酸分子杂交可分为 DNA-DNA 杂交、DNA-RNA 杂交和 RNA-RNA 杂交等类型。在 DNA-DNA 杂交中,常用的方法有 Southern 印迹法。Southern 印迹法能检测特定 DNA 片段在样本中的存在和含量。而在 RNA 检测方面,Northern 印迹法是常用的核酸分子杂交技术之一。核酸分子杂交的灵敏度很高,有时能检测到极微量的核酸。
[名词解释] 核酸分子杂交 相关知识点: 试题来源: 解析 热变性的DNA经缓慢冷却过程中,具有碱基序列部分互补的不同的DNA之间或DNA与RNA之间形成杂化双链的现象称为核酸分子杂交。 根据同源DNA或RNA片断能互补杂交的原理而设计的一种诊断技术,是诊断传染病、遗传病的重要手段之一,在生物学和医学上有着广泛的应用前景...
所谓杂交(hydridization)指两个以上的分子因具有相近的化学结构和性质而在适宜的条件下形成杂交体(hybrid),杂交体中的分子不是来自一个二聚体分子。同一个二聚体中的两个分子在变性解离后重组合称为复性。利用两条不同来源的多核苷酸链之间的互补性而使它们形成杂交体双链叫核酸杂交。与核酸杂交技术相对应的另...
核酸的分子杂交是定性或定量检测特异RNA或DNA序列片段的有力工具。它是利用核酸分子的碱基互补原则而发展起来的。在碱性环境中加热或加入变性剂等条件下,双链DNA之间的氢键被破坏(变性),双链解开成两条单链。这时加入异源的DNA或RNA(单链)并在一定离子强度和温度下保温(复性),若异源DNA或RNA之间的某些区域有互补...
核酸的分子杂交检查过程: (1)rRNA-DNA杂交:变性rRNA与变性DNA混合时,rRNA与其互补的DNA链形成杂交双链,rRNA分子与异源DNA杂交时,也能在其同源区形成互补双链,这种杂交双链的稳定性与其同源性成正相关,适于细菌属及属上水平的分类研究。现最常用的是硝酸纤维膜结合法。
探针:在核酸分子杂交体系中,杂交的双方是待测核酸序列和已知核酸序列,已知核酸序列又称为探针(probe)。 探针的功能: (1)带有可检测标记 (2)探针需要事先设计且已知序列,通过与转移膜上的核酸杂交,获得或判断代检测核酸样品的相关信息。 探针的种类: (1)cDNA探针(complementary DNA) 通过逆转录获得cDNA后,将其克...
核酸分子杂交的原理是通过探针和靶标之间的互补配对,来确定目标核酸的序列和结构。 方法 核酸分子杂交的方法多种多样,常见的方法包括:杂交化学、Southern杂交和Northern杂交。 1. 杂交化学是通过化学反应将探针和靶标的核酸序列进行杂交。常用的方法包括:- DNA-DNA杂交:将DNA探针与靶标DNA在一定条件下进行杂交,通过...
核酸分子杂交是在核酸变性及复性基础上建立起来的实验技术,是具有一定同源序列的两条单核苷酸链按碱基互补配对原则在退火条件下形成异质双链的过程。蛋白质杂交则是一种以抗原—抗体特异性结合为基础的生物技术。分子杂交技术 作为探针的已知DNA或RNA片段一般为30~50核苷酸长,可用化学方法合成或者直接利用从特定细胞中...