有限稀释法是一种常用的克隆方法，是指将需要再克隆的细胞株自培养孔内吸出并作细胞计数，计出1mL的细胞数。常用来筛选融合的动物细胞。操作过程 用HT培养液稀释， 使细胞浓度为50～60个/mL，于96孔培养板中每孔加0.1mL(5.5个细胞/孔)。接种2排，剩余细胞悬液用HT培养液作倍比稀释，再接种2排，如此类推...
在有限稀释法中,用一种稀释液将高浓度的样品稀释到一定的浓度范围内,然后从稀释好的样品中取出适量的样本进行实验。通常情况下,每次的稀释倍数为2,这样可以方便计算样品的最终浓度。 实验步骤 1.准备样品和稀释液 首先准备好需要稀释的样品和用于稀释的溶液。这里以细胞悬液为例,常用的稀释液有PBS(磷酸盐缓冲液)、...
在杂交瘤亚克隆的应用中,有限稀释法具体操作如下: 对杂交瘤细胞进行适当的稀释以使细胞能以三种浓度铺板,分别是 100 个细胞/孔、10 个细胞/孔和 1 个细胞/孔。初始克隆鉴定出的抗体分泌阳性孔,让细胞生长到近 80%的汇合,然后轻轻地重悬,并进行活细胞计数。取 5000 个活细胞转入装有 5ml 含 HT 的 DMEM 完全...
有限稀释技术 有限稀释技术是2007年公布的免疫学名词。定义 一种细胞学技术。即通过不断稀释，至每个组分仅包括1个细胞，从而制备单个细胞组分。出处 《免疫学名词》。
有限稀释法是克隆化培养动物细胞的一种方法。将细胞悬液进行连续倍数稀释,最终调整密度为5个/mL;将稀释好的细胞悬液接种于96孔板,每孔加0.1mL;24h后在显微镜下挑选只含一个细胞的孔,补加培养液后继续培养获得细胞克隆。相关说法错误的是( )A. 培养液中需含有蔗糖、血清等物质 B. 96孔板需置于CO2培养箱中培养...
有限稀释法是克隆化培养动物细胞的一种方法。将细胞悬液进行连续倍数稀释,最终调整密度为5个/mL;将稀释好的细胞悬液接种于96孔板,每孔加0.1mL;24h后在显微镜下挑选只含一个细胞的孔,补加培养液后继续培养获得细胞克隆。相关说法错误的是( ) A. 培养液中需含有蔗糖、血清等物质 B. 96 孔板需置于CO2培养箱中...
与极限稀释法相比,有限稀释法的操作相对简单,对设备和技术的要求也较低。 总的来说,极限稀释法和有限稀释法的区别在于稀释的程度和目的不同。极限稀释法追求将样品稀释到极限状态,以便进行精确的计数或分离操作;而有限稀释法则是为了调整样品浓度以适应实验需求,不追求极限稀释状态。 请注意,以上解释是基于对这两种...
有限稀释法是一种进行克隆化的常用手段。首先，从培养瓶中吸取生长状况良好的细胞，并对其进行细胞计数，计算出每毫升细胞数量。随后，使用HT培养液对细胞进行稀释，使细胞浓度达到50至60个/毫升，并在96孔板中每孔加入0.1毫升细胞悬液（每孔约含五六个细胞）。接着，在板中接种两排细胞，然后将剩余的...
有限稀释法作为常见的单克隆抗体筛选方法，在实验室中广泛使用，但其存在诸多技术瓶颈，如繁琐的人工操作...