ELISA法灵敏度高，检测的数量级可以达到10-8，也是抗体亲和力测定常用的方法。ELISA测定方法：抗体与定量的抗原在溶液中温育进行反应，反应平衡后，将溶液转移到含有固相抗原的聚苯乙烯微板内，用间接ELISA法测定游离抗体量。根据OD值计算亲和力常数KD。当抗原量大于10倍抗体量时，可以忽略抗体含量。计算方法如下所示，其...
在进行ELISA法检测抗体亲和力实验时,需要确保抗原不会破坏反应体系的平衡。通常可以用以下操作步骤来确定该包被抗原的浓度是否过高: 包被抗原板,然后用30%的MPBS室温封闭2h,PBS洗涤; 准备梯度稀释的抗体溶液(稀释前的抗体浓度与竞争ELISA实验中的抗体浓度相同),每个稀释液取100mL;加入第一块抗原板中,一式三份(见下图...