1、Western blot实验技巧之蛋白样品制备、SDS-PAGE胶制备、跑电泳、转膜、孵育抗体、显影和ImageJ分析(来自一位可稳定重复WB结果的科研狗之四年经验总结) 2、“玄学”实验-Western blot的内参你选对了吗? 3、SDS-PAGE凝胶制备技巧,易翻车点及其解决方法汇总(五年经验结晶) 4、石蜡切片和冰冻切片之
SDS-PAGE:使用带有4-12% Bis-Tris凝胶和GelCode Blue染料的Invitrogen NuPAGE Mini-Gel电泳系统(Life Technologies)分析人源IgG抗体样品,并在45°C下热应激14天后再次分析相同的样品。样品用水稀释至0.2 mg/mL,再用4×Invitrogen NuPAGE LDS样品缓冲液(Li...
抗体药物纯度分析（CE-SDS、SDS-PAGE、SEC、RP等）抗体药物是一类通过人工合成的抗体来治疗疾病的药物，通过与目标分子特异性结合从而达到治疗的目的。常见的抗体类药物类型包括单克隆抗体、人工合成的抗体片段、免疫毒素、抗体药物共轭物等。抗体类药物在治疗多种疾病方面表现出显著的疗效，如癌症、自身免疫性疾病、炎症...
SDS-PAGE凝胶电泳根据蛋白质的相对分子质量对蛋白质进行分离，相对分子质量存在差异的蛋白质可以通过电泳分离成不同的蛋白质条带，因此可以用于检测抗体产品是否含有其他杂质蛋白。对于已知分子量的抗体，若电泳后只有一条该分子量的条带，则说明该抗体产品不含其他杂质蛋白；反之，则说明其含有杂质蛋白，其含有的杂质蛋白...
4)加入2倍柱体积0.1 M柠檬酸(Citrate Acid, pH 2.7)封闭流出管,静置5分钟后收集穿出液,重复三次。测定OD280估算抗体浓度,如果所得抗体较多可以使用SDS-PAGE检测纯度。也可以选择0.1 M甘氨酸(Glycine, pH 3.0)洗脱。 5)洗脱后的抗体立即加入2/5体积的1 M Tris...
此时SDS-PAGE应出现两条带:一条对应重链残留部分(结合Fab’区域,约50 kDa)和轻链(约25 kDa)*。若未完全消化或含有Fc段,其他条带(如50 kDa以上或更小)可能提示消化失败。3. **交叉验证**: 通过比较未处理IgG的条带(非还原条带为150 kDa,还原后为50 kDa重链和25 kDa轻链),若处理后样本非还原条件仅剩...
经过前期处理以后，变成线性的条带，亚单位也会解离，变成重链和轻链的条带。例如IgG，本来的分子量应该是150K左右，跑完SDS-PAGE后，会变成重链约55kDa和轻链约25kDa左右的条带。
测抗体纯度用sdspage就可以了 有两种形式：非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳NativePAGE及SDS聚丙烯酰胺凝胶SDSPAGE；非变性聚丙烯酰胺凝胶，在电泳的过程中，蛋白质能够保持完整状态，并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。 而SDSPAGE仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开...
利用SDS-PAGE电泳方法或毛细管电泳法(CE-SDS),对蛋白(抗体、抗原)进行纯度分析,确保广泛分子量范围的各种蛋白质均可获得最佳的分辨和检测效果。 2、 实验样品要求 浓度大于0.5ug/ul,体积大于50ul, 含盐量不超过20mM 3、 项目内容 4、 结果展示 图1 SDS-PAGE电泳图 ...
专利摘要:本发明提供了一种双特异性抗体SDS‑PAGE的检测方法,包括以下步骤:S1,双特异性抗体SDS的前处理:将样品稀释适当浓度,加入上样Buffer,配置成电泳上样体系;将配置好的样品,短时离心;金属浴或水浴70℃加热时间为3min～10min,室温放置,降至室温,再短时离心后准备上样;S2,上样、电泳:上样前准备好电泳槽、...