因此,需要添加一些PCR反应增强剂(市面上通常成为GC buffer,PCR enhancer buffer),能够有效降低高GC模板和具有复杂二级结构模板的解链温度,促进高GC片段的PCR扩增。还可以通过改进PCR反应程序如提高变性温度、使用Tm值较高的引物(>68℃)方便在较高温度下进行退火、使用两步法扩增程序。 有些目的片段则是A、T两种碱基...
MET扩增是指MET基因的拷贝数(GCN)增加,包括多体(Polysomy)和局部扩增(Focal Amplification)两种形式。MET是NSCLC精准治疗的重要靶点之一。MET异常主要包括MET基因14外显子跳跃突变、MET扩增和c-MET蛋白过表达三种类型,其中MET扩增已成为NSCLC患者靶向药物耐药后治疗的重要分子标志物。 多体是指整条染色体重复,即细胞中出...
基因扩增通常是指某一个特定基因拷贝数选择性的增加,其他的基因拷贝数没有按照比例增加的过程。 基因扩增通常是指细胞内选择性的增加,产生大量的拷贝,导致体内的基因序列异常,使错误的DNA复制或者修复,导致遗传元件偶然捕获导致的DNA重复,以及人工聚合酶链式反应扩增。 基因扩增通常会在肿瘤发生的过程当中见到,是因为体内...
临床可以通过 MET GCN 以及 MET/CEP7 比值来判断扩增情况,区分扩增和多体。 图4. 单个肿瘤细胞核的表达(MET/CEN7探针和DAPI)。MET基因用绿色信号标记,7号染色体的着丝粒用红色信号标记:野生型(A)、扩增(B)[6] 2022年发布的《非小细胞肺癌MET临床检测中国专家共...
核酸扩增检测技术具有灵敏、特异、快速、操作简便等特点,近年来广泛应用于感染性疾病诊断、遗传病的辅助诊断、病原体基因分析及耐药基因检测、个体化用药指导等方面,为医学和生命科学研究提供了强大的技术支持。近年来,新核酸扩增检测技术不断涌现,如超敏PCR技术、数字PCR技术和恒温扩增技术等,为核酸扩增检测技术向更快...
MET扩增是原发肿瘤重要的驱动变异,也是EGFR‐TKI等耐药的重要机制之一,可作为晚期患者耐药后联合靶向治疗的潜在分子标志物; · MET扩增需要区分局部扩增和多体两种不同的形式,其中局部扩增相对于多体,更有可能是肿瘤发生、发展和治疗的重要因素; · FISH是检测MET扩增的金标准,但并不适用于组织样本难以获取的患者。
2 基于PCR技术对全基因组扩增的初次尝试 第一次扩增基因组使用了一种非变性引物(non-degenerated primers),这些引物的结合位点是全基因组中的重复Alu motifs部分中最保守的区域。该技术称为“分散重复序列PCR( interspersed repetitive sequence,IRS PCR)”,可直接扩增与Alu 原件相毗邻的片段。Alu 原件在人类基因分布...
缩略语:DNA,脱氧核糖核酸;LAR,连接酶扩增反应。 瓣膜内切酶-1 DNA聚合酶为基础的扩增 通过DNA聚合酶的瓣膜内切酶-1家族成员对特定DNA结构的识别和裂解,可以进行等温探针扩增(见图8)。裂解反应要求探针只在其3′域与感兴趣的目标核酸互补。第二个「入侵者」探针紧靠第一个探针...
基因扩增检测一般是阴性好。 基因扩增是常见的基因突变的一种形式,通过扩增目标DNA片段,能够实现对基因型的快速、准确的检测。一般在基因扩增检测中,阴性结果通常表示样本中不含有目标基因序列或者基因相关突变,即表明疾病或异常状态不存在,具有很强的排除诊断价值。而阳性结果表示样本中存在目标基因序列或者基因相关突变,...
拷贝数扩增是导致癌基因激活的常见因素，癌基因的扩增通常是局灶性且高幅度的，在某些情况下，癌基因是在一次DNA双链断裂（DSB）之后通过断裂-融合-桥（breakage-fusion-bridge，BFB）循环线性扩增的，即染色体断裂、DNA复制、姐妹染色单体融合、双着丝粒染色体桥形成，导致另一次断裂的循环。除了BFB循环之外，染色体碎裂...