体外诱导成脂分化时，细胞会由最初的长梭形或多边形逐渐变圆，直至最后形成一个典型的脂肪细胞，可经油红O染色法鉴定，分化后的细胞会有明显脂肪滴产生，染色后在显微镜下呈现显著的红色，未分化细胞则无明显颜色。背景说明 背景说明 形态上，体外诱导成脂分化时，细胞会由最初的长梭形或多边形逐渐变圆，直至最后...
成脂细胞里有脂联素基因。脂联素基因（LeptinGene）在成脂细胞中是被表达的。脂联素是一种由脂肪组织分泌的蛋白质激素，它在机体内发挥着重要的代谢调节作用，尤其与食欲和能量消耗的调节密切相关。脂联素基因编码的是脂联素的前体蛋白，经过加工后形成成熟的脂联素。在脂肪组织中，脂联素基因的表达水平与脂肪细...
成脂细胞分化实验步骤(1)人牙髓间充质干细胞成脂分化实验操作方法 一.试剂配制: 1.吲哚美辛(消炎痛)(357.79):母液50mM,应用液100μM 1.地塞米松(392.46):用无水乙醇配制10mM,-20℃避光保存,工作液用PBS稀释成1mM,4℃保存,应用液1μM地塞米松 2.胰岛素:用冰醋酸生理盐水配制母液1mg/ml,应用液浓度10μg/...
成脂诱导过程对细胞刺激比较大,细胞容易飘,除了明胶,还可以用多聚赖氨酸或者血清进行包被。 2. 接种诱导细胞:取对数生长期的细胞,按照3×10^4cells/c㎡的细胞密度接种至包被后的培养器皿中,于37℃,5% CO₂培养环境下培养至汇合度90-100%,弃掉上清,加入入成脂诱导分化培养基诱导液(以下简称“诱导液”)。
3T3-L1细胞是一种源自小鼠胚胎的成纤维细胞系,因其具有体外分化为类脂肪细胞的能力,成为研究肥胖和糖尿病等代谢性疾病的重要工具。以下为详细的成脂诱导分化步骤:1. 细胞准备:首先,将3T3-L1细胞正常培养至融合度达到80~90%,随后用胰酶消化并计数。 2. 接种细胞:以2~3×10^4cells/cm^2的密度将细胞接种于六孔...
在3T3-L1细胞的成脂诱导过程中换液需要轻柔,建议沿着培养器皿侧壁轻柔滴加诱导液,以防止细胞脱壁。 细胞在预冷时容易皱缩,增加脱壁的风险。每次换液前,培养基应当充分预热。 诱导液配制后应尽快使用,一般不超过3个月。📌 染色注意事项: 当观察到脂滴时,便可以进行油红O染色。如果脂滴较小,可以延长诱导时间2...
成脂分化经油红O染色法鉴定，成骨分化经茜素红染色法鉴定，成软骨分化经阿尔辛蓝染色法鉴定。成骨诱导分化步骤 1.接种骨髓间充质干细胞：取对数生长期的细胞，按照2×104cells/cm2的细胞密度接种至包被后的培养器皿中，于37℃，5% CO2培养环境下培养至汇合度60-70%，弃掉上清，加入成骨诱导分化培养基。2....
有些细胞在成骨诱导过程中，会继续增殖，甚至出现部分区域细胞堆叠的情况，显微镜下观察疑似“钙结节”，但其实是细胞聚集形成的，因此茜素红染色不深或者无法染色。特别提示：不同组织来源的间充质干细胞和不同状态的间充质干细胞诱导出现钙沉积的时间和数量差异巨大，据了解有些脐带间充质干细胞出现钙沉积的时间...
细胞成脂或成骨诱导 一、技术简介 干细胞和祖细胞群体存在于多种成体组织中,包括皮肤、肌肉、骨髓和脂肪。越来越多的研究表明这些细胞可能具有多系分化的潜能,能够生成除来源组织以外的细胞类型。近年来,人们发现成体脂肪组织可作为间充质干细胞另外一个丰富的来源。这残细胞被命名为脂肪来源的干细胞(ASCs)。在特定...
3T3-L1成脂诱导—铺板注意要点 1. 3T3-L1诱导过程中贴壁能力下降，细胞易脱壁，建议在铺板前使用0.1%明胶包被，可有效改善细胞贴壁能力。2. 3T3-L1起始密度不宜过低，一般为90%-100%，过低的铺板密度会导致脂滴较少。3. 使用对数生长期的细胞进行诱导，一般复苏后建议至少传代1次再进行铺板。3T3-L1诱导前起始...