1、 慢病毒转染前18-24小时,将贴壁细胞以1×105/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×105/孔左右。 2、第二天,用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基,加入适量病毒悬液。37℃孵育。 3、(对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)4小时后加入2ml新鲜培养基以稀释polyb
病毒感染12-16小时后,观察细胞状态,更换新鲜培养基。去除孔板中培养基,每孔加入500uL完全培养基。如细胞状态差,需尽快更换;如状态良好,可在24小时内换液,但不宜超过24小时。📅 第五天:观察表达情况 病毒感染细胞72小时后,如载体上有荧光蛋白(如GFP、mCherry等),可在荧光显微镜下观察细胞判断慢病毒感染效率。若...
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慢病毒感染贴壁细胞实验步骤 以 24 孔板为例。 第一天:准备细胞 将状态良好的目的细胞接种到 24 孔板中,细胞计数后,进行铺板,每孔加入 500ul 培养基。保证第二天感染病毒时融合率达到 30~40%。通常,24 孔板内以 5~8 x 10 4 cells/孔的密度铺板。 第二天:病毒感染,换液 1. 计算病毒加药量 选择合适 ...
慢病毒感染贴壁细胞实验步骤 以24孔板为例。 第一天:准备细胞 将状态良好的目的细胞接种到24孔板中,细胞计数后,进行铺板,每孔加入500ul培养基。 保证第二天感染病毒时融合率达到30~40%。通常,24孔板内以5~8x10 4 cells/孔的密 度铺板。 第二天:病毒感染,换液 ...
实用指导（二）：慢病毒感染贴壁细胞实验步骤 和元生物|2016-03-1513:51 慢病毒慢病毒（Lentivirus）是一类改造自人免疫缺陷病毒(HIV)的病毒载体，基因组为RNA，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。慢病毒基因组进入细胞后，在细胞浆中反转录为DNA，形成DNA整合前复合体，进入细胞核后，DNA整合到细胞基因组中。...
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1、 慢病毒转染前18-24小时,将贴壁细胞以1×105/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×105/孔左右。2、第二天,用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基,加入适量病毒悬液。37℃孵育。3、(对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)4小时后加入2ml新鲜培养基以稀释polybrene。4、继续...
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