1.新药申报时,对药物遗传毒性研究所采用的标准试验组合二:一项细菌回复突变试验,一项啮齿类动物造血细胞微核试验和第二项体内试验(彗星试验、转基因小鼠体内突变试验、DNA 共价结合试验)。 2.新化学物质申报时,当所提交的三项体外致突变存在阳性结果时,根据不同的遗传终点,选择对应或不同遗传终点的体内致突变试验,如彗...
新药申报时,对药物遗传毒性研究所采用的标准试验组合二:一项细菌回复突变试验,一项啮齿类动物造血细胞微核试验和第二项体内试验(彗星试验、转基因小鼠体内突变试验、DNA 共价结合试验)。 2) 新化学物质申报 新化学物质申报时,当所提交的三项体外致突变存在阳性结果时,根据不同的遗传终点,选择对应或不同遗传终点的体内致...
彗星试验是一种用于检测细胞DNA损伤的化学方法。当细胞受到内外源DNA损伤因子的作用时,DNA链可能会发生断裂,导致超螺旋结构被破坏。通过化学手段使细胞膜和核膜破裂,细胞内的蛋白质、RNA和其他成分会扩散到细胞裂解液中,而核DNA由于分子量较大,会留在原位。在碱处理和碱性电解质的作用下,DNA会发生解螺旋,损伤的DNA断...
一.几种常用的彗星试验检测方法：细胞制备：彗星试验的第一步是制备细胞悬液。通常使用哺乳动物细胞（如人外周血淋巴细胞、成纤维细胞等）或培养细胞。细胞悬液的制备需要确保细胞的活性和完整性，通常通过离心和洗涤步骤来去除杂质和死细胞。单细胞凝胶制备：单细胞凝胶是彗星试验的关键组成部分。该凝胶由低熔点琼脂糖...
彗星试验的方法现在越来越多地用于包括眼科学在内的医学中。其中一个原因是氧化应激越来越多地被认为是各种疾病的发病机制,而彗星试验是一种可以间接量化氧化应激的方法。 试验过程 1.试剂的制备 通过向培养基中加入PBS(1L包)和990ml dH 2 O 制备Dulbecco的磷酸盐缓冲盐水(PBS)(不含Ca ++,Mg ++)溶液。将pH调...
本文旨在通过整合并分析相关文献,深入剖析体内彗星试验的基本原理、应用范围、实验方法及其未来的发展趋势,以期为读者提供一个全面而深入的理解。 一、体内彗星试验的基本原理 体内彗星试验,亦称碱性单细胞凝胶电泳(Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE),其独特之处在于能够在单细胞水平上精准地检测DNA损伤。其基本原理...
下面是彗星试验的步骤: 1.实验前准备: -准备细胞培养物:选择一种常用的哺乳动物细胞系,如人肺细胞株。培养细胞,并确保细胞处于稳定的生长状态。 -准备测试物溶液:将待测试的化合物溶解在适当的溶剂中,以得到所需的浓度。根据先前的研究或文献,确定起始浓度和待测物的浓度范围。 2.计算细胞培养物数量: 根据实验...
单细胞凝胶电泳是检测DNA损伤快速、简便、敏感、经济的方法,因其细胞电泳形状颇似彗星,又称彗星试验(cometassay)。 技术原理:基于有核细胞的DNA分子量很大,在DNA超螺旋结构附着在核基质中,用琼脂糖凝胶电泳将细胞包埋在载玻片上,在细胞裂解液作用下,细胞膜、核膜及其他生物膜破坏,使细胞内的RNA、蛋白质及其他成分进...
彗星试验，亦称单细胞凝胶电泳实验。是指一种通过检测DNA链损伤判断遗传毒性的技术。它能有效地检测并定量分析细胞中DNA单、双链缺口损伤的程度。当各种内源性和外源性DNA损伤因子诱发细胞DNA链断裂时，其超螺旋结构受到破坏，在细胞裂解液作用下，细胞膜、核膜等膜结构受到破坏，细胞内的蛋白质、RNA以及其他成分均扩散...