在选择基因干扰靶点时,需要考虑以下原则: 1.目标基因的重要性:选择具有重要生物学功能或已知相关性的基因作为干扰靶点。这些基因可能参与生物体的重要生理过程,具有关键调节作用。 2.基因表达水平:选择表达水平较高的基因作为靶点,因为这些基因可能在生物体中扮演重要角色。 3.专一性:选择具有较高特异性的基因作为靶点...
靶点序列选择是RNA干扰技术靶点设计中的关键步骤之一。选定的靶点序列应具有一定的保守性和特异性,以确保沉默效应的专一性和高效性。靶点序列的选择主要基于两个原则:GC含量和序列特异性。GC含量是指靶点序列中GC碱基的比例,GC含量通常在40%到60%之间可以使得siRNA与靶mRNA形成更稳定的复合物。序列特异性则是指siRNA与...
于是,研究者采用全基因组CRISPR干扰(CRISPRi)技术确定了对51个调节AUR抗药性和61个调节AUR敏感性的基因(图2B),其亚细胞定位显示线粒体和细胞核分别是调节AUR抵抗力和敏感性的中心位置(图2C和D)。通过整合CRISPRi结果与半胱氨酸反应性评分,研究者推测CHK1可能参与了细胞核ROS的感应和反应,从而调节癌细胞对AUR的敏...
PNAS|RNAi抗病毒的新靶点:毛凯/Gary Ruvkun合作揭示肌醇六磷酸调控RNA干扰和抗病毒免疫的机制 RNA干扰(RNAi)是真核生物古老的病毒防御途径,在非脊椎动物、植物和真菌中尤其有效。病毒产生的双链 RNA(dsRNA)被细胞识别后会触发靶标 RNA 裂...
1.靶向HIV的RNA干扰靶点序列,其选自:\r\r\r\r\n (1)SEQ ID NO:1-32中任何一个所示的序列,或者\r\r\r\r\n (2)与(1)中序列具有至少70%(优选至少80%、85%、90\r\r\r\r\n%、95%、98%或更高)一致性的序列,或者\r\r\r\r\n (3)在严紧条件下或者高度严紧条件与(1)中序列能够杂交的\r\...
15.权利要求14的改造的细胞,其在基因组中或者基因组外携带权利要求1中所述的RNA干扰靶点的编码核酸序列,这些编码核酸序列与表达控制序列可操作地连接,使得可在该细胞中表达所述siRNA。 16.权利要求15的改造的细胞,其中所述细胞是哺乳动物细胞。 17.权利要求16的改造的细胞,其中所述哺乳动物细胞是人细胞。 18.权利...
制药前沿，简述HBV新药物靶点，技术应用领域RNA干扰及单抗 所谓新的，即有别于核苷（酸）类似物（NAs）和干扰素（IFN）的作用机理，全球在研乙肝新药多数机制都与NA或IFN不一样。新药物靶点全球主要也可以分为两大类，一类是新型直接作用抗病毒药物（DAA）包括病毒进入抑制剂、RNA干扰（小干扰RNA，siRNA和反义寡...
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本研究结果显示,我们构建的慢病毒RNA干扰载体对鼠NIH/3T3细胞具有较高的感染效率.RT-PCR和Westem blot检测证实mTOR基因的mRNA和蛋白水平在感染携带干扰靶点的慢病毒后显著降低,从而可以有效地沉默NIH/3T3细胞中的mTOR基因表达,这表明有效RNA干扰的靶点设计成功,为进一步研究mTOR基因在ARMD小鼠模型中的作用提供了可靠的...
摘要: 目的:设计并筛选针对人STAT1基因有效的RNA干扰靶点.方法:根据人STAT1基因序列,设计3个干扰序列,将oligo退火成双链并连接穿梭载体pLKO-1-EGFP-puro-shRNA,构建shRNA慢病毒载体质粒,并转化至感受态细胞DH5a,进行测序验证.在脂质体介导下转染293T细胞,包装生产慢病毒.慢病毒载体... 查看全部>> ...