Ab-LNP的详细流程包括mRNA体外转录、LNP脂质组分(含修饰脂质)、LNP-mRNA的包封、抗体功能化与Ab-LNP化学偶联(第一步的mRNA制备将不再重复,详见上篇)。 01 LNP脂质组分 研究中使用的脂质纳米颗粒(LNP)包含5种脂质组分,分别为:可电离脂质C14-4、辅助磷脂DOP...
马来酰亚胺使用的反应缓冲液中不得存在含有硫醇的化合物,例如二硫苏糖醇(DTT)和β-巯基乙醇(BME(也称为2-巯基乙醇)),因为这些化合物会竞争偶联位点。例如,如果使用DTT还原蛋白质中的二硫键以便用巯基基团进行偶联,则在开始马来酰亚胺反应之前必须使用脱盐柱...
马来酰亚胺(maleimide)是一种含有马来酰亚胺基团(C4H3NO2)的有机化合物。巯基是一种含有巯基功能团(-SH)的化合物。巯基与马来酰亚胺发生反应时,会发生巯基与马来酰亚胺之间的加成反应,形成硫醚结构。 结构式表示为: 马来酰亚胺: C2H2(NC(O)CHCH) 巯基: R-SH 反应产物: C2H2(NC(O)CHCHSR)...
SH - PEG - MAL（巯基聚乙二醇马来酰亚胺）是一种用于生物偶联反应的多功能试剂，广泛应用于生物医学研究和生物技术领域。这种试剂结合了巯基（-SH）、聚乙二醇（PEG）和马来酰亚胺（Mal）的特性，具有高度的反应活性和生物相容性。以下是关于它的详细介绍。巯基（-SH）部分 巯基是一种具有高反应活性的官能团，能够...
基于巯基-马来酰亚胺偶联法制备Ab-LNP,对抗体的预处理主要为蛋白酶切割和还原反应。文中提到了多种不同来源、不同形式的抗体预处理方法。 抗人CD5抗体用IgG降解酶(如IdeZ)切割,抗小鼠CD5抗体用pepsin切割,抗小鼠CD7抗体用ficin切割。而F(ab)2形式的抗体片段需再进行一步还原反应,如添加二硫苏糖醇(DTT),后续...
马来酰亚胺和巯基的偶合是蛋白和多肽偶联中的一个非常有用的反应。这个反应很特别,即使在其它功能基存在下,它也可以在温和的条件下(中性及弱酸性条件下pH6.5~7.5)选择性地与活性药物的自由硫基(-SH)键连形成稳定的硫醚键,在pH>7.5时,会与NH2反应,并且发生马来酰基水解反应,在PH7时MAL与SH反应速率是NH2的1000...
马来酰亚胺-聚乙二醇-巯基(MAL-PEG-SH)是一种具有马来酰亚胺(MAL)和巯基(SH)官能团的聚乙二醇(PEG)衍生物。这种化合物在生物分子修饰和药物递送等领域具有重要的应用。 1. 生物分子修饰: MAL-PEG-SH可以用于连接两个具有相应反应官能团的生物分子。例如,马来酰亚胺能与氨基(如赖氨酸侧链的氨基)反应,巯基则可以...
CY5.5-SH主要通过巯基官能团与其他生物分子发生反应，适用于多种生物分子的标记；而CY5.5-MAL则通过马来酰亚胺官能团特异性地与含有巯基的生物分子反应，具有较高的选择性和灵敏度。在应用方面，CY5.5-SH常用于蛋白质、肽和寡核苷酸的标记以及多色荧光成像；而CY5.5-MAL则广泛应用于蛋白质标记、细胞成像、生物...
ICG-Maleimide的化学反应机制是一种巯基与马来酰亚胺的加成反应,常被称为巯基-马来酰亚胺反应。 该反应的机制如下: 1. 马来酰亚胺官能团中的双键具有亲电性,而巯基中的硫原子具有亲核性。 2. 在适当的条件下,巯基与马来酰亚胺发生亲核加成反应,形成一个四元环中间体。
图1:(A) 与链间半胱氨酸随机连接;(B) 与双马来酰亚胺试剂交联;或 (C) 与工程半胱氨酸特异性偶联。 2.与马来酰亚胺的反应 马来酰亚胺容易通过硫醇基团的亲核迈克尔加成反应发生烷基化反应,形成稳定的硫醚键。在 pH 值为 6.5-7.5 的范围内,马来酰亚胺反应对硫醇具有特...