🔍巢式PCR,一个独特的PCR技术,通过两对引物进行两轮扩增。它的工作原理是:第一对引物(外引物)首先对DNA模板进行扩增,这一步与普通PCR相似。然后,第二对引物(内引物)在第一轮扩增产物的内部结合,进行第二轮扩增,使得最终产物片段比第一轮更短。💡巢式PCR的优点在于其高特异性。如果第一轮扩增产生了错误片段,...
巢式PCR一般是有两对引物的,一对outer引物,一对inner引物。一般建议为了方便,inner引物直接根据目标序列来设计引物(和普通PCR引物设计方式一样),而outer引物则从目标序列前后两端的序列开始设计,也就是说上下游各往前后移动一些碱基开始设计引物。outer和inner引物的设计应含有重叠区域,重叠区域一般为10bp比较合适。 如...
巢式PCR的实验原理为根据DNA模板序列设计两对引物,利用第一对引物(称为外引物)对靶DNA进行15-30个循环的标准扩增;第一轮扩增结束后将一小部分起始扩增产物稀释100-1000倍加入到第二轮扩增体系中作为模板,利用第二对引物(称为内引物或巢...
巢式PCR引物的设计
巢式PCR中的引物设计 一、明确答案 巢式PCR中的引物设计是关键步骤,需充分考虑目标基因的序列特点、引物的长度、Tm值、GC含量及自身互补性等因素。二、详细解释 1. 了解巢式PCR原理:巢式PCR是一种基于PCR技术的变型,通过设计两对引物进行连续PCR扩增,从而增加检测灵敏度。因此,引物的设计直接影响巢...
巢式PCR的引物设计通常涉及两对引物:外引物(outer)和内引物(inner)。设计时,内引物的定位至关重要,通常直接针对目标序列进行设计,其方法与常规PCR引物设计相同。外引物的设计则稍有不同,从目标序列的两端出发,向内稍作延伸。理想情况下,外引物和内引物之间应有重叠区域,10个碱基的长度较为...
百度试题 结果1 题目巢式PCR通常设计两对引物,第二对引物在靶序列中第一对引物位置的外侧。()A.对B.错 相关知识点: 试题来源: 解析 B 反馈 收藏
软件名称巢式PCR引物设计软件 软件简称-版本号V1.0 登记号2024SR0598998分类号- 著作权人吉林农业大学首次发表日期2024-01-16 登记日期2024-05-06 该公司其他软件著作权 序号登记日期软件全称软件简称登记号版本号 12025-02-12瓦氏雅罗鱼池塘养殖环境监测管理系统-2025SR0245448V1.0 ...
在进行巢式PCR时,第一轮和第二轮的引物设计应满足以下哪些条件()A.第一轮和第二轮的引物可以相同B.第二轮的引物应该结合在第一轮引物的内侧C.第一轮和第二轮的引物退火温度必须相同-e卷通组卷网
本专利“外引物可降解的巢式PCR”是一种酶解代替纯化的单管两轮PCR,其特征是引物末端至中部含1个或以上dU及RNA碱基的外引物PCR于矿物油密闭下预扩放大后,其RNA/dU外引物被加入UDG及RNA酶的内引物荧光PCR酶解,以及预设外引物PCR液中过量底物和Mg巢式pcr引物设计专利技术,