Annexin V实验通常情况下细胞分群比较明显，设门其实不复杂——在FSC/SSC图上圈出目的细胞群，注意细胞碎片的位置，调整好补偿后画十字门，结合对照组微调十字门的位置。在FSC/SSC图上圈目的细胞群的时候要注意：有部分细胞可能会因为凋亡发生明显皱缩，FSC会比正常细胞小一些（图7左侧部分），这部分信号也要圈进来，...
1、阳性抗体对照：选做 一般第一次做ChIP实验时需要做一个阳性抗体对照，用于验证整体实验样本和实验体系的有效性，阳性抗体通常选择与比较保守的已知靶标蛋白相结合的抗体，例如组蛋白H3抗体或RNA Polymerase II抗体等。但阳性抗体对照的实验结果只是用于评估实验体系是否成功，不参与后续的荧光定量PCR数据分析。而且后续...
➤整个操作需要在冰上操作。 释放的染色质需要通过超声或酶切的方法将其打断到一定范围大小,染色质片段化的大小是ChIP实验的一个关键点。超声是使用最广泛的片段化方法,通过物理作用将DNA的共价键打断,实现染色质随机片段化。但是需要注意的是,超声在破碎DNA的同时,也会在一定程度上破坏蛋白和DNA之间的相互作用。因...
➤设置好对照组实验。阴性对照常用抗体同型IgG或标签抗体加入只有标签蛋白载体的样本。 ➤抗体选择非常重要,不是所有抗体都适合做ChIP实验,在WB验证中表现很好的抗体,也可能不适用于ChIP。相比较而言,IF和IHC是在固定条件下进行的,可能用于ChIP实验。建议优先考虑那些专门为ChIP验证过的抗体。 ➤如果目标蛋白没有...
4. 血管形成实验 (1)将24孔板和1ml枪头放在冰箱或冰上20-30分钟后再使用,这样BME就不会过早固化。 (2)将250µl低生长因子的BME加入24孔板中,移液过程中避免产生气泡,确保胶完全覆盖孔底。 (3)将24孔板在37°C和5% CO2中孵育30分钟以固化BME。
洞底陷阱：若孔洞下方放置垫料或食物诱饵（用于特定实验设计），需确保动物无法通过洞口接触实物，否则会诱发过度探索（假阳性）。三、实验流程：从“抓鼠”到“数据分析”的全流程拆解 1. 预适应阶段（关键！易被忽视的误差来源）实验室适应：提前3天将动物饲养笼移至实验房间，每天1小时，使其熟悉环境气味、光照和...
更是整理了之前的大物实验详细攻略入口 帮助大家复习 详情点击图片进入查看 分光计的调节和使用 戳图查看详情 注意事项 分光计所有螺丝禁止过分用力旋拧(1)仪器调节,先粗调再细调(2)在视野中寻找亮十字(3)使亮十字与上方十字等高读数以游标上的零刻度为准,若游标零线...
实验三 观察叶绿体和细胞质流动1、材料:新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶,口腔上皮细胞临时装片2、原理:叶绿体在显微镜下观察,绿色,球形或椭球形。用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。知识概要:取材 制片 低倍观察 高倍观察考点提示:(1)为什么可直接取用藓类的小叶,而不能直接取用菠菜...
实验中，将动物放置在空旷场地的特定位置，利用摄像系统监控动物在空旷场地的活动情况，利用VisuTrack视频记录与分析软件(上海新软)追踪动物的活动轨迹，收集并分析数据。前期准备：1.放置处理结晶的旷场实验箱(为了提高实验效率，可以对称放置四个实验箱，同时进行实验)；2.将相机支架放在实验箱正上方，将相机连接电脑，...