套式PCR的模板是DNA,一般是为了提高敏感性,先用外套引物进行扩增,扩增产物再用内套引物进行第二次扩增。RT PCR扩增的原始模板是RNA,需先把RNA逆转录成cDNA,然后才能用DNA聚合酶进行PCR扩增。
RT-nPCR实际叫做反转录-巢式PCR,反转录PCR就是把RNA提取后反转录成cDNA,并以其为模板进行的PCR反应,通常用于检测某种RNA是否被表达,或者比较其相对表达水平 巢式PCR(nested PCR),是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应。在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内...
套式RT-PCR检测牛呼吸道合胞体病毒的研究
- PCR 方法比普通RT - PCR 更加灵敏、可靠,可用于PEDV 的快速诊断和流行病学调查。 关键词:猪流行性腹泻病毒;套式RT - PCR;酶切鉴定 1 前言 猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是 由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,
李金海,等.O型、A型及Asial型3个型口蹄疫病毒通用套式RT.PCR检测方法的建立 785 口蹄疫(Foot.and.mouthdisease,FMD)是由El蹄 疫病毒(FMDV)引起的偶蹄动物的烈性传染病,其 主要特征是在口腔粘膜、蹄部、乳房皮肤出现水疱 和溃疡,该病被OIE列为法定通报传染病,我国也 ...
Taura综合征病毒套式RT—PCR检测方法的建立及应用 维普资讯 http://www.cqvip.com
RNA病毒的遗传物质是RNA,而常规PCR只能扩增DNA。反转录PCR(RT-PCR)首先利用反转录酶将RNA逆转录为互补DNA(cDNA),随后进行PCR扩增,因此适用于RNA病毒的检测。选项分析:A.反转录PCR(RT-PCR):正确,专门用于RNA检测。B.套式PCR:通过两次扩增提高特异性,但目标仍是DNA,无需反转录。C.多重PCR:同时扩增多个DNA靶标...
目的:建立博尔纳病病毒(BDV)荧光定量套式RT-PCR检测方法,为快速、准确地定量检测BDV奠定基础.方法:根据BDV P24基因序列,设计并合成引物和荧光标记探针.将PCR扩增的BDV P24基因片段克隆入载体,重组质粒经筛选、鉴定后,作为阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测.结果:应用量组质粒制作的定量曲线循环...查看全部>> ...
C12N 15/11(2006.01)C12R 1/93(2006.01) (54)发明名称 检测猪Pegivirus的套式RT-PCR引物组、试剂盒及应用 (57)摘要 本发明涉及生物技术技术领域,特别涉及一种检测猪Pegivirus的套式RT -PCR引物组、试剂盒及应用。所述的检测猪Pegivirus的套式RT -PCR引物组,其特征在于包含外围引物PPgV –F1、PPgV ...
本发明提供的简套式荧光RT-PCR法检SFTSV用的试剂盒,其中包含有两种外引物和两种内引物和一种探针,它们的DNA序列分别为:外引物一P1:5’-agt?tca?cag?cag?cat?gga?gag?gat?-3’外引物二P2:5’-agg?ttg?atg?gca?ctc?cag?gag?aaa?-3’内引物一P3...查看全部>> ...