大肠杆菌(Escherichia coli)是人类肠道定植菌群之一,也是分子生物学实验室最常用的模式生物和工具。为了适应分子生物学实验多样化的需求,衍生出了五花八门的大肠杆菌菌种。常用的大肠杆菌菌株主要分为两大类,一类菌种有利于高效转化质粒和分子克隆产物,质粒的产量和稳定性较高,非常适合分子克隆;另外一类菌株能够大量表达外...
耀海生物遵守ICH指导原则、药典,及结合丰富的项目经验,搭建了成熟的大肠杆菌菌种建库服务流程:01优势菌筛选与PCB建立02GMP二级库建立(MCB与WCB)03菌种库的检定与放行04菌种的合理储存图2: 大肠杆菌菌种建库的流程优势菌筛选与PCB建立优势菌,尤其是优势宿主的筛选至关重要。一方面能够筛选优质的候选菌种,增加建库的...
为了能够长期的保存大肠杆菌菌种且不破坏其结构,通常将含有足量细菌的液体培养基离心后在沉淀中加入等量40%甘油,-80℃冻存。之所以选择甘油是因为甘油即使在超低温冻结的情况下其体积也不会产生剧烈变化,不会导致由于其冰冻后体积的改变而压迫菌种导致菌种结构的改变。 等到需要的时候再将超低温冷冻的菌体,融化...
大肠杆菌TOP10菌种是一种用于克隆和质粒制备的K-12系菌种。产品特点:1.核酸内切酶缺陷,能够有效提升制备的质粒DNA的质量。2.三条重组途径均失去活性,能够有效提高DNA插入片段的稳定性。3.EcoK甲基化修饰和限制系统缺失,故可用EcoK位点甲基化和非甲基化的DNA(如PCR产物)进行转化并制备非甲基化的DNA。4.McrA、McrBC...
大肠杆菌菌种的制作及保藏 一、实验原理 1、分离原理用伊红美蓝培养基检测大肠杆菌。伊红为酸性染料,美蓝为碱性染料。当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色,再与美蓝结合形成紫黑色菌落,并带有金属光泽。从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。从而可从众多的菌落中把大肠杆菌选择出来。 2、保存原理:将...
感受态细胞的制备和转化是分子生物学实验中频繁使用的重要操作,最早的大肠杆菌感受态细胞制备的方法是Cohen等人于1972年建立的,该方法的主要原理是细菌通过冰冷的CaCl2低渗溶液处理后,加入待转化质粒DNA,经42 ℃短时间热冲击,细菌细胞可增加对该质粒DNA的摄入,该法已成为目前实验室制备感受态细胞的常规实验方法。
中文名称:大肠杆菌Tuner(DE3)菌种 上海雅吉生物科技有限公司 联系电话: 021-34661275 产品介绍: 中文名称:大肠杆菌Tuner(DE3)菌种 上海联迈生物工程有限公司 联系电话: 13052188602 产品介绍: 中文名称:大肠杆菌Tuner(DE3)菌种 上海彩佑实业有限公司 联系电话: ...
大肠杆菌Tuner菌种是在BL21基础上开发的、专门用于精确控制IPTG诱导表达的菌种。产品特点:1.携带DE3溶源性?噬菌体,其上的lacUV5启动子可以驱动T7 RNA聚合酶基因表达。2.乳糖转运酶缺失,使得启动子lacUV5的活性可以通过IPTG浓度进行精准调节,最低可诱导浓度可以低到10μMIPTG。3.编码Lon和OmpT两个蛋白水解酶均缺失,...
首先,生长环境的因素可能会影响大肠杆菌的生长速度。例如,温度、pH值、营养物质的含量以及氧气水平等环境因素都会对细菌的生长产生影响。如果这些因素不适宜或者不稳定,就会导致大肠杆菌生长缓慢。 其次,大肠杆菌自身的生理状态也可能导致生长缓慢。例如,当细菌暴露在有害化学物质或抗生素中时,可能会抑制其生长。此外,细菌...
1、大肠杆菌菌种的制作及保藏谢雪芳一、实验原理1、分离原理用伊红美蓝培养基检测大肠杆菌。伊红为酸性染料,美蓝为碱性染料。当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色,再与美蓝结合形成紫黑色菌落,并带有金属光泽。从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。从而可从众多的菌落中把大肠杆菌选择出来。2、保存原...