大肠杆菌电转化感受态细胞制备 第一天: 1.将适合菌株(如XL1-Blue, DH5α)置于LB或其他营养丰富的培养基上,在37°C 下过夜培养 2.高温灭菌大的离心瓶(250-500ml)以备第二天摇瓶用 3.准备几瓶灭菌水(总量约1.5升),保存于冷冻室中以备第二天重悬浮细胞用 第二天: 4.转移0.2-1ml过夜培养物至装有500ml LB(或其他
在电转化过程中，使用感受态细胞进行DNA转化可以提高转化效率和获得更多的转化子。因此，制备感受态细胞及其转化方法研究对开展基因克隆和表达等方面的研究具有非常重要的意义。1.大肠杆菌菌株及培养基选择 本实验使用大肠杆菌DH5α菌株，培养基为Luria-Bertani（LB）培养基。2.细胞质壁分离方法 将DH5α菌株经过预培养后...
1、大肠杆菌电转化感受态细胞制备第一天: 1. 将适合菌株如XL1-Blue, DH5置于LB或其他营养丰富的培养基上,在37C下过夜培养 2. 高温灭菌大的离心瓶250-500ml以备第二天摇瓶用 3. 准备几瓶灭菌水总量约1.5升,保存于冷冻室中以备第二天重悬浮细胞用 第二天: 4. 转移0.2-1ml过夜培养物至装有500ml LB或...
转化大肠杆菌,感受态细胞的制备,蓝白斑筛选,热击转化,电转化,化学转化——分子生物学实验教程,生物化学教程是转化大肠杆菌,感受态细胞的制备,蓝白斑筛选,热击转化,电转化,化学转化——分子生物学实验教程,生物化学实验教程的第1集视频,该合集共计6集,视频收藏
大肠杆菌电转化感受态细胞制备及转化方法 大肠杆菌电转化感受态细胞制备及转化方法 (Jin Quan‐Wen Lab at XMU) 一、大肠杆菌电转化感受态细胞制备:一、大肠杆菌电转化感受态细胞制备: 第一天:第一天: 1. 用枪头或接种环挑取单克隆菌落, 接种入盛有5ml LB液体培养基的培养管中,可以准备两管。37C,220rpm,培...
细胞复苏和弥合,从而实现质粒DNA的物理转移。为避免电击时出现“击穿”,即产生电 流,细胞悬浮液中应含有尽量少的导电离子。转化效率为109〜1010转化子/卩g DNA 3.1 (1)感受态细胞及材料准备同钙转化感受态细胞的制备相同。 (2)选合适的大肠杆菌在4C,3000rpm下离心10min,弃上清液(如需要,沉淀可在4C的10%扌油...
DE3电转化感受态细胞制备及转化方法 一、大肠杆菌电转化感受态细胞制备: 第一天: 1.用接种环挑取单克隆菌落,接种入盛有50ml LB液体培养基的三角瓶(250ml)中。37C,220rpm,培养过夜(12个小时左右)。 2.高温灭菌超纯水、50ml离心管、10%甘油、1.5mlEp管、LB液体培养基和大、中、小枪头个1盒。 第二天: 1....
大肠杆菌电转化感受态细胞制备第一天,将适合菌株,如,置于或其他营养丰富的培养基上,在,下过夜培养,高温灭菌大的离心瓶,以备第二天摇瓶用,准备几瓶灭菌水,总量约,升,保存于冷冻室中以备第二天重悬浮细胞用第二天,转移,过夜培养物至装有,或其他营
电转化法制备大肠杆菌..1.前夜接种受体菌( DH5α或 DH10B),挑取单菌落于 LB 培养基中 37℃摇床培养过夜;2.取 2ml过夜培养物转接于 200ml LB 培养基中,在 37℃摇床上剧烈振荡培养至 OD600=