多重qPCR曾应用的实例场景如：高血压用药指导基因检测、脑脊髓炎病毒检测、肿瘤病毒检测等等，应用场景十分...
多重qPCR也是在一管内完成多个目标基因的检测,要区分这些目标基因的荧光信号,通过SYBR Green I染料标记扩增产物就无法实现,因此常用探针法来进行多重qPCR,即针对每一个目标基因,设计特异性探针,利用不同探针上标记的荧光基团,结合仪器对不同通道荧光的检测能力实现对多个靶标的实时定量检测。 多重qPCR常用的探针 多重...
在多重qPCR方面，阅尔基因进行了大量探索工作，比如基于多色编码组合的 Color-Mix策略、可用于RNA病毒分型的caPCR系统等等。近日，阅尔基因联合复旦大学附属中山医院、同济大学附属肺科医院 ，在经典的国际权威期刊《Nucleic Acids Research》(IF=16.6)发表了CCMA(Color Cycle Multiplex Amplification...
多重qPCR之所以复杂困难,在于存在多个靶点之间扩增条件不兼容,每个靶点都需要引物的配合,就好比:“两人绑腿赛跑”,每个靶点的成功扩增都需要被捆绑在一起的两个人(一对引物)默契配合。而多重PCR就需要多对选手同时起跑又同时到达,并且所有参赛的每对选手都有最好的,且均衡的发挥。 多重PCR的前因后果 多重PCR(mult...
多重qPCR，作为一种能在单个PCR反应中同时扩增并定量检验多个基因片段的技术，近年来在科研、临床诊断及药物研发等领域得到了广泛应用。而其原料酶，作为分子诊断领域的关键试剂，其性能对多重qPCR实验的成败和效率至关重要。随着国内多重qPCR原料酶技术的迅猛发展，国产试剂在产品特异性、扩增效率及质量控制方面都取得了...
多重qPCR 引言 多重定量PCR(Multiplex PCR),是一种可以高通量检测,可以节省样品,还可以降低成本的技术。这么优秀的它为什么一直“被沉默”?因为做好它需要耗费科研人员大量的精力和时间,颜色也仅仅可以做到三四重,二重居多。本文为大家介绍做到五重荧光定量PCR的两大要素,具体请看下文。
多重扩增 超多重qPCR的另一个难点来自于引物二聚体和非特异性扩增的干扰。为了弥补单条引物浓度下降带来的扩增效率降低,多重扩增体系通常会增加循环数和退火延伸时间,这也加剧了二聚体甚至多聚体的形成。 目前主流的抑制二聚体的思路包括1)设计具有特殊结构的引物;2)使用UDG酶、Cas9或基于片段大小的纯化方法去除二...
近日,阅尔基因联合复旦大学附属中山医院、同济大学附属肺科医院在国际核酸领域顶级期刊Nucleic Acids Research(IF=16.6)发表了 CCMA(Color Cycle Multiplex Amplification)多重扩增技术,通过设计同一靶标多个扩增子之间可控的 Ct 延迟实现多色编码组合,极大提高了单管荧光定量 PCR(qPCR)反应的检测通量。理论上,仅需4个...
多重qPCR(multiplex quantitative Polymerase Chain Reaction,mqPCR)则是结合实时定量PCR技术的多重PCR。它在多重PCR的基础上,通过添加特异性引物和探针,并利用荧光信号实时监测PCR过程,从而实现对多个DNA片段的实时定量检测。 多重qPCR探针“全家桶”探针是一种用于探测、测量或识别目标物质的工具或技术。在科学研究和医...
赛默飞多重实时荧光定量PCR技术可以在同一反应中同时扩增和检测多个基因,有效克服了单重反应对生物样本量的限制,提高实验效率。