国际囊泡协会（MISEV2018）规定了外泌体鉴定的最小实验要求，包括1） 总体表征：至少3个阳性蛋白（至少包括1个跨膜蛋白和1个细胞溶质蛋白）和1个阴性蛋白标志物。外泌体阳性蛋白标志物可选择跨膜蛋白CD9、CD63、CD81，以及溶质蛋白TSG101、Alix、HSP70。外泌体阴性蛋白标志物可选择内质网蛋白Calnexin、细胞核蛋...
WB检测结果提取的外泌体可成功检测到标志蛋白CD63、CD81和CD9的表达。 外泌体活性检测 细胞对自身分泌的外泌体敏感,在加入从该细胞上清中提取出来的外泌体后,细胞迁移速度发生改变。因此,小伙伴利用此方法检测外泌体活性。 划痕试验结果表明在MDA-MB-231细胞中加入提取的外泌体后,细胞迁移率随着加入外泌体的含...
1、 纳米流式总会有阳性结果,其原因大致因为纳米流式是对单个外泌体进行独立检测,不像Western Blot一样会受到杂蛋白的影响而降低上样孔中有效EV蛋白量的占比,因此更容易出现阳性结果。 2、 纳米流式的结果显示出的外泌体的经典蛋白标志物在实测样本中的占比并不高,大部分在10%以下,这就解释了为什么研究人员通...
因此,研发小伙伴利用此方法检测外泌体活性。 划痕试验结果表明在MDA-MB-231 细胞中加入提取的外泌体后,细胞迁移率随着加入外泌体的含量增加而提高,所分离得到的外泌体具有活性。 荧光DiR标记KYSE410细胞外泌体 荧光DiR记KYSE510细胞外泌体 荧光DiR标记YES2细胞外泌体 荧光标记的HaCaT外泌体 荧光标记的人角质形成...
取外泌体后进行total RNA提取(, ER501),反转录后定量检测(, AQ601)miRNA(miR-92a) 、lncRNA(RN7SL)、mRNA(MTND4)的表达。 适用于多种细胞上清外泌体提取 提取不同种类细胞上清中的外泌体,WB检测外泌体标志蛋白表达。 WB检测结果显示提取的不同细胞上清外泌体均可检测到外泌体的标志蛋白TSG101的表达。
血清中外泌体通过WB检测外泌体标志蛋白的表达 WB 检测结果提取的外泌体可成功检测到标志蛋白CD63、CD81 和CD9的表达。 外泌体活性检测 细胞对自身分泌的外泌体敏感,在加入从该细胞上清中提取出来的外泌体后,细胞迁移速度发生明显改变。因此,研发小伙伴利用此方法检测外泌体活性。
外泌体是细胞分泌的大小约为30-200nm的纳米物质,是细胞外囊泡的一类,结构类似于细胞,磷脂双分子层表面具有多种特异性膜蛋白,内部携带着多种蛋白质、RNA、DNA等重要生物信号物质,广泛分布于血液、尿液、脑脊液、唾液、乳汁、胆汁等各种体液中。 外泌体与标志物研究 ...
研究团队以36例肝癌患者和12例健康对照的血浆样本进行了外泌体的阵列捕获和原位免疫印迹检测。以程序性细胞死亡配体1(PD-L1)和外泌体标志蛋白Syntenin-1为例,仅用1 μL的血浆样品,即可实现外泌体蛋白质标志物的高灵敏度、高通量检测,所发展的分子探针为肿瘤的早期诊断提供了新的分子工具。
一些旨在分析外泌体蛋白生物标志物的探索性研究利用了高通量技术,包括抗体芯片和质谱分析。例如,Jaworski等人使用RayBio细胞因子芯片比较了感染人类1型T淋巴细胞病毒(HTLV-1)的T细胞系释放的外泌体与未感染的T细胞释放的外泌体的细胞因子谱。他们观察到来自不同细胞系的外泌体具有不同的细胞因子谱,来自HTLV-1感染细胞...
既往研究报道了肿瘤来源的外泌体蛋白在肿瘤进展、免疫调节和转移中的预后和功能重要性,并探讨了细胞外纳米颗粒的异质性,定义了三个不同的亚类,即小外泌体(Exo-S)、大外泌体(Exo-L)和外泌颗粒(exomere),统称为EVP。越来越多的证据表明,EVP可用于早期癌症检测、预后和指导治疗。研究人员介绍,本项最新研究将...