方法:体外培养SVOG细胞(人卵巢颗粒细胞系)、KGN细胞(人卵巢颗粒细胞瘤细胞)、人原代卵巢颗粒细胞;采用超高速离心法分别从3种不同来源卵巢颗粒细胞上清中分离提取外泌体,通过透射电子显微镜、纳米跟踪技术、蛋白质印迹法分别鉴定其形态结构、粒径大小、阳性相关特异性蛋白CD63、TSG101及阴性标记蛋白Calnexin的表达。 结果...
本项目拟采用多种技术对人脐带间充质干细胞及其来源外泌体进行分离、鉴定及保存,并对外泌体进行蛋白质分析,确定外泌体与其母系细胞具有相同或不同的特征,从而明确外泌体源自人脐带间充质干细胞; GO及 KEGG检测结果显示,外泌体具有与其母系细胞相关的免疫特性(低免疫原性),从而证实人脐带间充质干细胞及其来源外泌...
外泌体:是细胞经过“内吞-融合-外排”等一系列调控过程形成直径40-100 nm的膜性脂质小囊泡,其内含有功能性蛋白质、mRNA、microRNA及长链非编码RNA等物质,在细胞间的信息传递过程中发挥重要作用,其载有的mRNA可在靶细胞内翻译出相应蛋白质,载有的microRNA可通过降解靶细胞内mRNA或抑制mRNA翻译来调控目的蛋白的表达。
本文档深入探讨了间充质干细胞(MSCs)来源的外泌体分离、鉴定技术及其在医学领域的广泛应用。首先,我们将详细阐述外泌体作为一种由MSCs分泌的纳米级囊泡,在细胞间通讯、免疫调节和疾病治疗等方面的重要作用。随后,文档将重点介绍外泌体的分离与鉴定方法,包括超速离心、过滤、免疫磁珠法、荧光激活细胞分选等技术,并对...
三种不同来源卵巢颗粒细胞外泌体的提取及鉴定 高婷, 马小红, 李晓荣 Extraction and identification of exosomes from three different sources of ovarian granulosa cells Gao Ting, Ma Xiaohong, Li Xiaorong 中国组织工程研究 . 2023, (6): 860 -865 . DOI: 10.12307/2023.222 ...
摘要目的：提取和鉴定巨噬细胞来源的外泌体，为后续开展外泌体相关的研究建立稳定的提取方法，并为当前外泌体的提取方法提供一定参考。方法：使用超速离心结合过滤法提取鼠源巨噬细胞培养上清液中的外泌体；通过马尔文粒度分析仪测定其粒径大小和电位，透射电镜观察其形态特征，BCA 试剂盒测定外泌体的含量，同时用...
人脐带间充质干细胞来源外泌体的提取、鉴定和蛋白组学分析 摘要: 文题释义: 外泌体:是平均直径为30-150 nm的细胞外囊泡,有双层脂质膜结构,具有识别未知细胞和分子机制的潜力,这些机制在细胞间通讯、维持体内稳态和疾病的发生发展中发挥着重要作用。外泌体由于具有低免疫原性、易于获得储存等优点,被认为是...
人根尖乳头干细胞来源外泌体的提取及鉴定
摘要:背景:外泌体是间充质干细胞分泌的膜性小囊泡,越来越多的研究表明,间充质干细胞可能通过旁分泌外泌体而发挥对组织损伤的修复作用,目前人脐血间充质干细胞来源的外泌体分离鉴定尚未见报道。目的:分离纯化人脐血间充质干细胞来源的外泌体,并鉴定其生物学特性。方法:收集人脐血间充质干细胞培养上清,采用超滤...
目的:提取并鉴定人尿源干细胞来源的外泌体(hUSCs-Exo). 方法:利用改良的尿液收集装置收集健康成年男性新鲜尿液,采用"一次离心法"从尿液中分离得到人尿源干细胞(hUSCs),对其进行培养,传代;通过CCK-8法绘制其生长曲线,流式细胞术鉴定其表面标记物,体外定向诱导其向成骨细胞,脂肪细胞分化,分别采用茜素红,Von Kossa...