Rabs蛋白/鸟苷酸三磷酸酶(GTPases) 调节外泌体膜与受体细胞的融合 外泌体中含RAB4, RAB5和 RAB11,RAB7 和 RAB9 膜联蛋白1、2、4、5、6、7、11 四跨膜蛋白家族(CD63, CD81 和CD9)) 热休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90 细胞特异性的蛋白包括A33(结肠上皮细胞来源) MHC-Ⅱ(抗...
外泌体大小约50-150nm,含有细胞膜常规的四跨膜蛋白(CD9、CD63、CD81等);热休克蛋白(Hsc70)、溶酶体蛋白(Lamp2b)、肿瘤敏感基因101(Tsg101)融合蛋白(CD9、flotillin,annexin)等蛋白,膜上胆固醇和二酰甘油含量较高。 三种细胞外囊泡均来自于细胞(为方便描述通常将生成胞外...
4、PM蛋白在CD9-EV中富集,而内体/溶酶体和PM跨膜蛋白都在CD63-EV中富集 为了更好地确定CD63+和CD9+EV的起源,并鉴定PM或内体释放的EV的特定标志物,研究者进行了定量质谱分析;同步分泌的CD63或CD9 EV的定量质谱分析揭示了质膜和内体衍生的EV的特征,PM蛋白在CD9-EV中富集,而内体/溶酶体和PM 跨膜蛋白都在...
其中CD63、CD9、CD81以及TSG101、HSP70、ALIX等，是最常用到的细胞外囊泡标志物。这些标志物蛋白其实主要是涉及到了囊泡的形成和分泌过程，他们产生于细胞中，定位于胞内的膜结构附近，如四旋蛋白（CD9，CD63和CD81），直接参与了细胞外囊泡内容物的分选；TSG101是ESCRT复合体相关的蛋白，而ESCRT复合体是膜形成...
外泌体形成过程中,在外泌体膜表面及囊泡内部,都会携带标志性的蛋白,对这些蛋白进行检测,就能判断是否成功提取到外泌体。目前,外泌体表面标志物鉴定中常用的检测指标有CD9、CD63、CD81、TSG101、Alix等。 蛋白质免疫印迹(WB) 要对蛋白质进行检测,很多人最先想到的就是蛋白质免疫印迹(Western Blotting, WB),这...
WB检测结果提取的外泌体可成功检测到标志蛋白CD63、CD81和CD9的表达。 外泌体活性检测 细胞对自身分泌的外泌体敏感,在加入从该细胞上清中提取出来的外泌体后,细胞迁移速度发生改变。因此,小伙伴利用此方法检测外泌体活性。 划痕试验结果表明在MDA-MB-231细胞中加入提取的外泌体后,细胞迁移率随着加入外泌体的含...
通过提取外泌体总蛋白,用Western Blot方法对目的蛋白进行相对定量,了解其在外泌体中的富集情况,或通过特有外泌体标志物的 Western Blot鉴定说明样本为外泌体。 WB鉴定外泌体常见指标:CD63/ CD81/ CD9/ TGS101/ HSP70 /Alix等,针对外泌体的定性检测,至少选择2-3个...
▷4.2.2.3 标志蛋白 ▷小细胞外囊泡表面标志物CD9、CD81、CD63 中的任意两个表达阳性;小细胞外囊泡内部标志物TSG-101、Alix 中的任意一个表达阳性。 ▷4.2.2.4 纯度 ▷小细胞外囊泡阴性标志物 GM130 或 Calnexin 应为阴性;小细胞外囊泡数量与蛋白量比值不低于1X1088个颗粒/μg 蛋白。