噬斑测定法最早是应用在病毒学研究中地。因为很多病毒,尤其是一些细菌性病原,能在宿主细胞中引起反应且这些反应通常表现为细胞溶解形成可见的斑点。科学家们通过观察这些斑点来判断病毒的活动性。而研究的深入。这种方法逐渐被用于免疫学的其他领域。特别是在检测抗体水平、识别病毒抗原等方面,取得了不小的突破。要想进...
在固体培养基上,若用适量的噬菌体和宿主菌液混合后接种培养,培养基表面可有透亮的溶菌空斑出现。一个空斑系由一个噬菌体复制增殖并裂解细菌后形成,称为噬斑(plaque);不同噬菌体噬珥的形态与大小不尽相同。若将噬菌体按一定倍数稀释,通过噬斑计数,可测知一定体积内的噬斑形成单位,(plaque form...
病毒滴度的测定方法有多种,包括:噬斑形成试验(Plaque Forming Assay, PFA):通过观察病毒在宿主细胞上形成的噬斑数量来计算病毒滴度。实时定量PCR(Quantitative PCR, qPCR):通过检测病毒遗传物质的数量来计算病毒滴度。酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA):通过检测病毒颗粒上的特定蛋白,...
为了减少交叉感染的可能,应挑取与邻近噬菌斑分离良好的噬菌斑 浩瀚新历史 11.将剩余的10mL培养上清制备噬菌体单链DNA(方案8)。细菌沉淀用于制备双链复制型(RF)DNA(方案11)。培养上清可在4C保存数月,并不会显著降低病毒滴度。噬菌斑挑取M13噬菌体可在上层琼脂 推荐权威三甲专家 吴杰副主任医师皮肤科 复旦大学附属...
plaque forming units, pfu)的数量,我们就能够得出该体积内噬菌体的总数。这段文字描述了在实验室中,通过观察噬菌体与宿主菌的互动以及它们在固体培养基上产生的噬斑来测定噬菌体数量的方法。通过计算每个空斑所代表的噬菌体复制增殖的个体数,即pfu,我们能够得出噬菌体的精确计数。
病灶形成测定 (FFA) 是噬菌斑测定的一种变体,但 FFA 不是依靠细胞裂解来检测噬菌斑形成,而是采用免疫染色技术,使用对病毒抗原具有特异性的荧光标记抗体来检测受感染的宿主细胞和传染性病毒。在实际斑块形成之前的病毒颗粒。FFA 对于定量不裂解细胞膜的病毒类别特别有用,因为这些病毒不适合噬斑测定。与空斑测定一样,...
噬菌斑的形成可用于检出、分离、纯化噬菌体和进行噬菌体计数。如,设0.10mL稀释度为10-6的病毒悬液可产生75个噬菌斑,则样品的噬菌斑形成单位为:PFU/mL=(75 PFU /0.10 mL )×(10^6)=7.5× 10^8
网络噬菌斑测定系统, 视频播放量 0、弹幕量 0、点赞数 0、投硬币枚数 0、收藏人数 0、转发人数 0, 视频作者 世联博研, 作者简介 专注微观力学(细胞力学:细胞拉力压力流体剪切力加载仪,细胞内源力牵引力显微镜,组织材料微观力学)和生物打印、酶联斑点分析仪、DNA合成仪,
实验原理 根据噬菌斑数计算病毒滴度。工具/原料 ? 1. 4% agarose gel:2g agrose 50ml 水,高压灭菌 ?2×Grace(unsupplemented):9.14g粉末(invitrogen) 0.07gNaHCO3 H2O,调PH6.1,定容至100ml,无菌过滤 ?supplemented Grace:1×Grace添加3.33mg/ml Lactalbumin,3.33mg/ml yeastolate,无菌...