所谓同聚物加尾法就是利用末端转移酶在载体及外源双链 DNA 的 3’端各加上一段寡聚核苷酸,制成人工黏性末端,外源 DNA和载体 DNA分子要分别加上不同的寡聚核苷酸,如 dA(dG)和 dT(dC),然后在 DNA 连接酶的作用下,连接成为重组的 DNA。这种方法的核心是利用末端转移酶的功能,将核苷酸转移到双链 DNA分子的突...
所谓同聚物加尾法就是利用末端转移酶在载体及外源双链DNA的3'端各加上一段寡聚核苷酸,制成人工黏性末端,外源DNA和载体DNA分子要分别加上不同的寡聚核苷酸,如dA(dG)和dT(dC),然后在DNA连接酶的作用下连接成为重组的DNA。基本信息 中文名称 同聚物加尾法 优点 2个 缺点 2个 利用媒介 末端转移酶的功能 ...
同聚物加尾连接法是在单体聚合反应中引入一种含有活性基团的化学试剂(称为“尾”),使得产生的线性聚合物上带有活性基团,然后再通过化学反应将它们连接起来形成更大分子量的高分子材料。 该方法主要包括以下步骤: 1. 合成含有活性基团的“尾”试剂。 2. 将“尾”试剂与单体进行共聚反应,得到带有活性基团的线性聚合...
以下是使用同聚物加尾连接法的一般实验步骤: 1.合成前体聚合物链: –首先选择适合的单体以及引发剂和溶剂。 –通过聚合反应,合成所需的前体聚合物链。 2.修饰聚合物链: –将前体聚合物链进行表面修饰,例如添加末端官能团。 3.准备连接反应体系: –按照一定的比例将两个修饰过的聚合物链混合。 –添加催化剂和溶...
这样的延伸片段,称之为poly(dA)尾巴(图2-7)。反过来,如果在反应混合物中加入的是dTTP,那么DNA分子的3′-OH末端将会形成poly(dT)尾巴。因此任何两条DNA分子,只要分别获得poly(dA)和poly(dT)尾巴,就会彼此连接起来。这种连接DNA分子的方法叫做同聚物尾巴连接法(homopolymertail-joining),简称同聚物加尾法。
下列关于同聚物加尾法的说法正确的是 ( 难度:4) A. 其核心是利用末端转移酶的功能,将载体和外源 DNA 的 3 ‘端再加上一段寡核苷酸。 B. 不易自身环化。 C. 连接效率高 D. 适用于 cDNA 克隆 E. 可能会产生某种限制酶切位点。 相关知识点: ...
同聚物加尾法优点: 1)首先不易自身环化. 2)因为载体和外源片段的末端是互补的黏性末端,所以连接效率较高. 3)用任何一种方法制备的DNA都可以用这种方法进行连接. 缺点:(1)方法繁琐;(2)外源片段难以回收。由于添加了许多同聚物的尾巴,可能会影响外源基因的表达.重组连接后往往会产生某种限制性内切核酸酶的切点....
同聚物加尾法优点A.实验步骤简单易行B.不易自身环化C.载体和外源片段末端互补的粘性末端,连接效率高D.适用于任何一种方法制备的DNA片段
利用末端转移酶在载体及外源双链DNA的3’端各加上一段寡聚核苷酸，使其变为粘性末端；;连接效率增高