原理:同源重组构建质粒的第一步是从两个不同的源中提取几块DNA片段,然后运用酶切或其它技术将这几块DNA片段连接到一起,形成一个新的DNA片段。这个新的DNA片段利用另一种技术使其进入受体细胞,随后在该细胞中“复制—重组”合成一种新的染色体。 同源重组构建质粒的核心技术在于能够将来自不同源的DNA片段精确地组...
(1)同源重组利用了类似于染色体互换的原理,两边的序列是与待敲除基因同源的序列,中间为其他序列,取代待敲除基因,故供体DNA片段的序列应为中间一段与待敲除基因不同的DNA序列、且其两侧为待敲除基因两侧的同源序列。(2)①卡那霉素抗性基因可作为标记基因,用于筛选SigB基因敲除的金黄色葡萄球菌。②PCR技术依据DNA复制...
通过体内同源重组可以进行靶向基因敲除,原理如图1所示。同源重组技术结合1c1'-sacB双重选择系统可对基因进行敲除与回补,研究基因的功能。图2是科研人员利用该方法对大肠杆菌LacZ基因进行敲除与回补的相关过程,其中tet'是四环素抗性基因,sacB基因是蔗糖致死基因,LacZ基因表达产物能将无色化合物X-gal水解成蓝色化合物。回答...
首先,两个DNA分子通过寻找彼此的同源序列进行配对。这个过程被称为同源配对或联会。在配对过程中,DNA分子的双螺旋结构被解开,使得碱基对暴露并相互识别。同源配对的区域被称为重组节点。2. 交叉点的形成一旦配对完成,交叉点的形成便开始。这些交叉点是同源重组过程中的关键步骤。它们是由DNA酶切割和交叉连接酶(如Rad5...
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谁能告诉我 同源重组双交换 去敲除基因的原理是什么呀?谢谢了 最好有图,或者给推荐一本讲的详细的书也行网友 1 最佳答案 回答者:网友 <现代分子生物学》第三版 朱玉贤 高等教育出版社。 里面涉及了动物的基因敲除技术 百度上也可以搜一搜我来回答 提交回答 重置等...
<现代分子生物学》第三版 朱玉贤 高等教育出版社。里面涉及了动物的基因敲除技术 百度上也可以搜360问答...
通常意义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。基因敲除技术常用于建立某种特定基因缺失的生物模型。例如,基因敲除模式小鼠制备技术图解如下: 请回答: (1)图中ES细胞(胚胎干细胞)存在囊胚的___部位,它具有体积小、细胞核大、___的特点。 (2)neor(新霉素...
基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。“基因敲除细胞”的构建过程如下: 第一步:从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞(ES),在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”。 第二步:构建基因表达载体。取与靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在
回答下列问题:(1)同源重组的原理如图1所示。图中剪刀代表的是一种核酸内切酶。当DNA被切开后,细胞中具有修复功能的酶可将这些切开DNA片段进行重新连接,这样SigB基因就能被其它碱基序列替换,实现SigB基因的敲除。结合图1的信息,为实现基因的敲除,供体DNA片段的碱基序列应为 ...