反相色谱法（英语：Reversed-phase chromatography，RPC）反相色谱法(IGC)一反普通气相色谱的测定方式。以被测的高分子为固定相、以惰性气体为流动相，为了测定需要，在流动相中加入一些探针分子，它们是挥发性的低分子。将探针分子注入气化室气化后，由载气带入色谱柱，测定它们在两相中的分配，从而研究高分产的各种...
在碱性 pH 条件下,硅胶会缓慢溶解,这会大大缩短 HPLC 色谱柱的使用寿命。基于硅胶的 HPLC 色谱柱流动相 pH 值的有效范围是 2 到 7,而基于聚合物的 RP 高效液相色谱柱在很宽的 pH 值范围内都很稳定,通常为 pH 值 1 到 13。 图6 固定相的类型。 与硅胶 RP-HPLC 色谱柱相比,聚合物 RPC 色谱柱可以选...
以十八烷基硅胶键合相(ODS)为固定相,以甲醇/水为流动相,就是典型的反相色谱。正相色谱与反相色谱这两种操作模式的主要区别如下。 (1) 固定相:正相色谱的固定相是极性的,反相色谱的固定相是非(弱)极性的。 (2) 流动相:正相色谱的流动相是非(弱)极性的,反相色谱的流动相是极性的。 (3) 流出次序:在正相...
反相色谱柱一般是由硅胶,有机/无机杂化硅胶或者聚合物作为基质, C18作为键合相。典型反相色谱柱基于分析物与烷烃链之间的疏水相互作用,根据样品组分的极性大小的差异而实现样品组分的分离。该分离模式有赖于色谱柱多孔基质内的C18键合相的自由伸展构象。...
反相色谱法是以表面非极性载体为固定相，以比固定相极性强的溶剂为流动相的一种液相色谱分离模式．反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团，基于样品中的不同组分和疏水基团之间疏水作用的不同而分离．在生物大分子分离中，多采用离子强度较低的酸性水溶液，添加一定量乙腈、异内醇或甲醇等与水互溶的有机溶剂作...
反相色谱法是以表面非极性载体为固定相，面以比固定相极性强的溶剂为流动相的一种液相色谱分离模式．反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团，基于样品中的不同组分和疏水基团之间疏水作用的不同而分离．质子性溶剂 能提供质子与溶质分子以氢键相缔合或形成配位阳离子的一类溶剂。一般为含有羟基或氨基的化合物，如：...
(二)反相色谱出峰原理 样品分子在极性流动相和非极性固定相之间进行分配,疏水性强(极性弱)的化合物保留强,后出峰;亲水化合物(强极性)保留弱,先出峰。 引用:使用C18色谱柱的反相方法,出现未知峰时,可大致判断该未知物质极性的强弱,给技术员参考性的建议。
反相液相色谱(RP-HPLC)在用于定量分析的高效液相色谱(HPLC)中占主导地位,它被用于80%的HPLC应用中(1-3)。RP-HPLC使用一种疏水性固定相和一种极性流动相,分析物主要依靠疏水作用来保留。由于优秀的精确度和可靠性,带有UV检测器的RP-HPLC被用于绝大多数药物纯...
反相色谱固定相通常由硅胶基质表面键合C18、C8或苯基等非极性基团构成。C18固定相因碳链较长,对疏水性物质保留能力更强,适用于分离极性差异较小的化合物;C8固定相保留能力相对较弱,常用于分析中等极性物质。流动相多采用水与有机溶剂的混合体系,常用甲醇、乙腈作为有机改性剂,通过调节两者比例改变洗脱强度。流动相pH...