这种层析法与普通的吸附层析法相反,故称为反相层析。目前用HPLC做反相层析常用的ODS柱,即在支持物的表面上连接了C18H37Si—基团。
反相层析 在吸附层析中,高极性物质在层析柱上吸附较牢,洗脱时发生拖尾现象和保留时间长的问题。如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类,洗脱液用极性强的溶剂,如甲醇和水的混合物。则被分离样品中的极性强的物质不被吸附,最先洗下来,得到较好的分离效果。这种层析法与普通的吸附层析法相反,故称为反相...
•反相层析机理普遍被人们接受的是由Horvath于1976年提出的疏溶剂理论（solvophobictheory）:疏溶剂理论假设反相层析介质是表面均匀密集的覆盖着非极性配基的颗粒，溶质分子由于受到极性流动相的斥力而以其疏水部分结合至固定相的非极性配基上，除此之外溶质与固定相之间不存在其他任何相互作用。硅胶类介质往往存在 “亲...
2.1反相层析作用原理疏溶剂理论（solvophobictheory）反相层析机理普遍被接受的是Horvath于1976年提出的疏溶剂理论，假设反相层析介质是表面均匀密集的覆盖着非极性配基的颗粒，溶质分子由于受到极性流动相的斥力而以其疏水部分结合至固定相的非极性配基上，除此之外溶质与固定相之间不存在其他任何相互作用 BioPharm 亲...
1. 分离效率高:反相层析填料可以有效地分离不同的化合物,特别是那些在极性相同的情况下难以分离的化合物。 2. 选择性强:填料表面的化学修饰可以调节其对不同化合物的选择性,从而实现更精确的分离。 3. 使用方便:反相层析填料不需要特殊的操作技能,只需按照标准操作流程即可进行分离。 4. 耐用性高:反相...
反相Flash柱层析能否采用干法上样？在实验室中，我们通常借助过柱机进行反相柱层析。但若没有过柱机，是否可以像正相柱层析那样进行手动操作呢？答案是肯定的。只不过，需要注意的是，C18填料相对昂贵，因此在实际操作中需要妥善重复利用，避免像普通硅胶那样使用后直接丢弃。接下来，我们将介绍加利福尼亚大学圣塔芭芭拉...
在进行反相柱层析时，我们通常以大比例的极性水溶液开始梯度洗脱。由于C18反相硅胶填料具有疏水性，其表面的疏水官能团在初始状态下会呈现蜷缩状态。为了确保填料的吸附活性，使用前需用极性有机溶剂进行活化，使疏水官能团得以舒展，然后再逐渐过渡到水溶剂。这一活化平衡的步骤至关重要，否则会影响分离效果。虽然实验室中...
•反相层析机理普遍被人们接受旳是由Horvath于1976年提出旳疏溶剂理论（solvophobictheory）:疏溶剂理论假设反相层析介质是表面均匀密集旳覆盖着非极性配基旳颗粒，溶质分子因为受到极性流动相旳斥力而以其疏水部分结合至固定相旳非极性配基上，除此之外溶质与固定相之间不存在其他任何相互作用。硅胶类介质往往存在 “亲...
反相层析