A:(1)形态学的观察,细胞突起变大、或细胞扁平; (2)β半乳糖苷染色判断细胞是否衰老; (3)增殖速率明显下降; (4)对相关的标志物进行检测。Q2:如何确保分离的原代细胞的活性A:(1)组织离体时间不能太久; (2)低温冰上分离,但也不能直接从-80℃冰箱上取出一块冰; (3)无菌操作体系; (4)消化酶的浓度和消化...
原代细胞(primary cell):是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。一、原代细胞的获取 原代细胞的获取,就是从活体上将组织分解成...
诱导变异性:多种试剂和培养基会诱导原代细胞的数据产生变异,研究者的处理手法也可能导致原代细胞的数据产生变异。 聚研好物推荐
严格来说,从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞,绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关),再加上取材,成本等因素,通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。 细胞系 原代细胞一般传至10代左右,大部分细胞衰老死亡,但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去...
Ham's F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。由于营养成分丰富,且可以使用较少血清,故也常作为无血清培养基的基础培养基。 8、M1...
在这里,选择商品化的原代细胞,可以给实验提供充足的保证,节省时间和精力。 Lonza原代细胞行业领导者(原美国Combrex),40多年细胞培养经验,来源丰富且稳定的捐献者,可以提供正常的、病理的多种原代细胞,严格的生产和质控检测,保证无与伦比的批间稳定性。
(1)原代细胞的培养方法 ① 组织块培养法 组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。② 消化培养法 ③ 悬浮细胞培养法 对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、...
原代细胞是从活体组织(例如活检材料)中直接获取,并在体外培养的细胞。由于这些细胞经历极少的群体倍增,因此比连续(肿瘤或人工永生化的)细胞系更能代表其来源组织的主要功能成分,使原代细胞成为体内状态更具代表性的模型。 通过使用不同种属来源的原代细...
胰蛋白酶(Tyrisin)是为一种蛋白酶,在细胞培养实验和原代细胞分离过程很常见,尤其是细胞传代或冻存消化过程最常见的酶,在此以0.25%胰酶配制举例:(1)称取胰酶:电子天平称取0.25g胰蛋白酶(Tyrisin),然后溶于100ml 无菌PBS;(2)低温低速搅拌:在胰蛋白酶加入到PBS中后,需要低温长时间搅拌(4℃/冰...
原代细胞诱导培养形成的破骨细胞周期长,一般在9-10天时才达到最佳状态;RAW 264.7诱导培养的周期稍短,一般在第5~6天时出现大量破骨细胞;除了TRAP染色鉴定破骨细胞,通过观察细胞核的数量以及降钙素受体染色和观察骨(牙)片吸收陷窝,可以进一步鉴定破骨细胞是否具有骨吸收能力。●参考文献● [1] 付应霄, 顾...