本申请所述复性缓冲液中同时包括β‑环状糊精和去污剂,二者能够发挥协同作用,进而使得利用所述复性缓冲液对包涵体进行蛋白复性时能够显著提高包涵体的复性效果,更利于变性蛋白质折叠为天然活性蛋白质。另外,利用所述复性缓冲液对包涵体进行复性的操作简单,成本低,重组蛋白产量高。 摘要附图 ...
4、本发明还提供一种重组人pai-1蛋白包涵体复性的方法,包括以下步骤:s10:制备pai-1蛋白的包涵体;s20:采用变性缓冲液溶解包涵体,获得包含裂解蛋白的包涵体变性液;s30:将包涵体变性液与上述任一实例的复性缓冲液混合后,对包涵体进行蛋白复性,获得复性后的pai-1蛋白。 5、与现有技术相比,采用该技术方案所达到的技术效果...
19.本技术第二方面提供了一种包涵体蛋白复性的方法,所述方法包括如下步骤:s1,诱导目的蛋白在宿主细胞中表达,然后裂解宿主细胞获得目的蛋白的包涵体;s2,对所述目的蛋白的包涵体进行洗涤和溶解后,获得目的蛋白的包涵体溶液;s3,将所述目的蛋白的包涵体溶液与如本技术第一方面所述的复性缓冲液混合后,对所述目的蛋白的包涵体...
用缓冲液E溶解包涵体,缓慢摇动使其缓慢溶解; 室温放置30min后10,000g离心10min,取上清。 5 使用BAC试剂盒(CatNo.:WBR0201)测出溶解的包涵体蛋白浓度 将蛋白浓度调整至0.1-1.0mg/ml 将蛋白浓度调整至0.5mg/ml左右。 6 将调整好的蛋白溶液装入透析袋中,放置于复性缓冲液Ⅰ(6M尿素)中,4℃缓慢透析6h。 将调整...
25.上述任一所述复性缓冲液在复性结核分枝杆菌包涵体蛋白中的应用也属于本发明的保护范围。 26.实验证明,采用本发明提供的复性缓冲液可以复性w544蛋白,复性得到的w544蛋白能有效刺激结核分枝杆菌感染小鼠的脾淋巴细胞产生免疫反应,同时不刺激健康小鼠的脾淋巴细胞产生免疫反应。由此可见,复性的w544蛋白具有很好的免疫原性...
我现在在做镍柱亲和层析,小量纯化,但是目的带在包涵体中表达,我是先将包涵体变性,变性剂用不同PH的尿毒,纯化后再复性,复性方法有很多种,我是用PH8.0尿毒进行梯度复性的:6M尿素(24h)---4M尿素(12h)---2M尿素(12h)---0.5M尿素(12h)---PBS(12h). 但是查有关资料,发现有的人复性用的是:6M尿素PBS缓冲液(...
8M尿素溶的包涵体,过了NI柱,透析复性时看到大家有用TGE缓冲液,我想问下需要在TGE缓冲液中加入尿素梯度透析吗 还是直接用TGE缓冲液多换几次就可以了 TGE缓冲液配方 ph 7.9 50mM Tris 0.5mM EDTA 50mM Nacl 5% 返回小木虫查看更多分享至: 更多 今日
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