分光光度计测定蛋白质浓度,其核心在于利用蛋白质对特定波长光的吸收特性。依据比尔-朗伯定律,光通过溶液时,其强度减弱与溶液浓度成正比。蛋白质在280纳米波长下具有显著吸光性,这主要归因于酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸的吸收。因此,通过分光光度计测量样品在此波长的吸光度,并对比标准曲线,即可精确计算出蛋白质浓度。这...
3. 测量吸光度:将样品加入分光光度计中,记录在280nm和320nm下的吸光度值; 4. 计算结果:根据已知的标准曲线计算样品中蛋白质的浓度,然后通过计算A280和A320之间的比值判断样品中蛋白质的纯度。 四、总结 分光光度计测蛋白质浓度的原理简单,操作便捷,且准确可靠。通过使用分光光度计,可以快...
其工作原理基于比尔-朗伯定律:当一束单色光通过任何浓度的溶液时,该光的强度将随着溶液的浓度增加而减弱,减弱程度与溶液的浓度成正比。 二、蛋白质的吸收特性 蛋白质在特定波长下具有较高的吸光系数,其中最常用的波长是280纳米。这是因为蛋白质分子中酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸会吸收这个波长的光线...
题目:【单选题】关于HiCN法原理,下列叙述错误的是A. 在标准条件下,HiCN摩尔消光系数为44L/(mmol·cm) B. 除SHb外,各种Hb均可被高铁氧化钾氧化成高铁血红蛋白 C. 高铁血红蛋白与CN-结合成稳定的HiCN,呈棕红色 D. HiCN在540nm处有一吸收峰 E. 在标准分光光度计上测得吸光度,经换算得Hb浓度(g/L) 来...
SOD比活力检测通常采用氮蓝四唑(NBT)法。其原理是在光化学反应系统中,当加入SOD时,由于SOD能够清除超氧阴离子自由基,从而抑制了NBT的光还原反应,使得NBT的还原产物——蓝色甲臜的生成量减少。通过测量一定时间内NBT的吸光度变化,即可计算得到SOD的活力,并通过与蛋白质浓度的比值得到SOD的比活力。
在蛋白质的光谱中,吸收强度与波长呈反比关系。当波长在280纳米左右时,蛋白质的吸收强度最大,因此可以利用这一特性来测定蛋白质的浓度。 二、光谱分析原理 超微量分光光度计的工作原理是通过可见光源产生吸收峰,然后测量样品的光谱吸收度来计算样品的浓度。在实验中,使用波长固定的紫外...