流式细胞凋亡圈门逻辑 样本制备阶段需要确保细胞状态良好避免假阳性干扰。处理时选择合适浓度的荧光染料比如AnnexinV-FITC与PI组合染色,避光孵育后立即上机检测。染色后的细胞悬液必须经过40μm滤网过滤,防止细胞团块堵塞流式细胞仪的流动室。 阴性对照设置必不可少。取三支空白管:未染色细胞作为FSC/SSC参数调节基准,单染管用
1 对照圈门 通常,做凋亡实验会有未处理组和处理组样本,如果未处理组的正常、早凋、晚凋细胞分群比较明显,门的位置就很好确定,那我们可以将对照组的门直接应用到处理组,这种通过对照确定圈门位置的方式也是很常见的一种方法。 2 热度条辅助法 理想中的分群总是想像左图这样?然而理论和实践总是有差别,有时候得到...
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1. 细胞处理:将待检测的细胞进行处理,如给予药物刺激、感染病毒等,以诱导细胞凋亡。 2. 收集细胞:将处理后的细胞进行收集,并进行细胞计数。 3. 细胞染色:使用Annexin V-FITC/PI染色试剂盒,按照说明书进行细胞染色。 4. 流式细胞仪分析:使用流式细胞仪进行细胞凋亡的分析。设置适当的激发波长和荧光检测通道,收集...
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