冰冻切片免疫荧光染色步骤 : (1)冰冻切片取出,室温放置使其干燥后,用冷丙酮于4℃固定10分钟。 (2)切片用0.01MPBS清洗后加入1.2%双氧水作用30分钟,以除去非特异染色。 (3)0.01M PBS清洗,3次×10分钟。 (4)0.3%Triton X-100作用30分钟。 (5)加入以抗体稀释液(含1%BSA的0.01M PBS,pH7.4)稀释至工作浓度的...
冰冻切片免疫荧光染色流程 一、准备液体和器材: 1. 表面活性剂:TBS-T,Triton X-100,PBS,Ethanol,DMSO; 2. 染色液:PBS,Trizma-HCL,和4%PFA; 3.小刀:刀片用于切片,可以用来将切片切割为更小的片段; 4.水槽:若可用多个水室,可以将液体装入不同的水室,流程操作更便捷; 5.酶标仪:一般是用来进行荧光染色的,...
(1)切片稍微甩干后用免疫组化笔在组织周围画圈(缩小范围,使抗体可以进行有效的孵育)。 (2)在圈内滴加3%BSA孵育2小时。 图2:特异性抗原抗体结合 5.免疫染色 (1)吸取封闭液,滴加稀释好的抗体,4℃湿盒中过夜孵育。 (2)1×PBS洗涤细胞三次,每次5分钟。 (3)在稀释好的...
1. 冰冻切片一般选择多聚赖氨酸黏附性载玻片,多聚赖氨酸处理载玻片是带强阳离子的,主要用于病理组织切片、液基细胞学涂片,作用是防止玻片掉片。冰冻切片之后如果不即时染色,可将片子放于负八十冰箱。再次取出后可先在室温晾干15分钟。然后置PBS中浸泡10分钟,以去除OCT; 2.用组化油笔将待染组织圈好,目的是为了在...
冰冻切片免疫荧光染色步骤: (1)冰冻切片取出,室 温放置使其干燥后,用冷丙酮于4C固定10分钟。 ( 2)切片用 0.01MPBS清洗后加入 1.2%双氧水作用30 分钟,以除去非特异染色。 ( 3) 0.01M PBS清洗,3次X1分钟。 ( 4) 0.3%Triton X-100作用30 分钟。 (5)加入以抗体稀释液(含1%BSA勺 0.01M PBS,pH 7.4)稀...
冰冻切片免疫荧光染色步骤 : (1)冰冻切片取出,室温放置使其干燥后,用冷丙酮于4℃固定10分钟。 (2)切片用0.01MPBS清洗后加入1.2%双氧水作用30分钟,以除去非特异染色。 (3)0.01M PBS清洗,3次×10分钟。 (4)0.3%Triton X-100作用30分钟。 (5)加入以抗体稀释液(含1%BSA的0.01M PBS,pH7.4)稀释至工作浓度的...
冰冻切片免疫荧光染色步骤: (1)冰冻切片取出,室温放置使其干燥后,用冷丙酮于4C固定10分钟。 (2)切片用 0.01MPBS清洗后加入 1.2%双氧水作用30分钟,以除去非特异染色。 (3) 0.01M PBS清洗,3次X1分钟。 (4) 0.3%Triton X-100作用30分钟。 (5)加入以抗体稀释液(含1%BSA勺 0.01M PBS,pH 7.4)稀释至工作...
冷冻组织切片--免疫荧光染色详细步骤冷冻组织切片免疫荧光染色 1.冷冻切片从-80℃拿出后室温放置15min 2.PBS浸泡10min,去除OCT 3.固定:4%多聚甲醛固定15min 4.漂洗:PBS X 3次,每次5min 5.穿透:0.3% TritonX-100,室温穿透组织15min 6.封闭:10% BSA室温封闭1h 7.孵一抗:用2%BSA配制一抗,4℃孵育过夜,...
冰冻切片免疫荧光染色步骤 : (1)冰冻切片拿出,室温搁置使其干燥后,用冷丙酮于4℃固定10分钟。 (2)切片用0.01MPBS冲洗后加入1.2%双氧水作用30分钟,以除掉非特异染色。 (3)0.01M PBS冲洗,3次×10分钟。 (4)0.3%Triton X-100作用30分钟。 (5)加入以抗体稀释液(含1%BSA的0.01M PBS,pH7.4)稀释至工作浓度...
冰冻切片免疫荧光染色步骤 : (1)冰冻切片取出,室温放置使其干燥后,用冷丙酮于4℃固定10分钟。 (2)切片用0.01MPBS清洗后加入1.2%双氧水作用30分钟,以除去非特异染色。 (3)0.01M PBS清洗,3次×10分钟。 (4)0.3%Triton X-100作用30分钟。 (5)加入以抗体稀释液(含1%BSA的0.01M PBS,pH7.4)稀释至工作浓度的...