抗体检测的是特定的抗原，因此在进行Western Blot实验时，选择合适的内参蛋白至关重要。β-actin是一种常用的内参蛋白，因为它具有多个显著优势：首先，β-actin作为看家基因编码的蛋白质，理论上在几乎所有细胞中都能检测到，这有助于判断实验体系是否正常。其次，如果实验中目的蛋白检测不到，但β-actin能...
一、大部分的基因都有beta-action基因和GAPDH基因,很多Affymetrix芯片都将它们设为一组观察RNA降解程度的内参基因。mRNA是按照5’至3’的顺序来降解的,通过比较它们3’相对于中间或者3’相对于5’的信号强度,可以很好地指示出试验质量。 二、beta-action基因对应的探针组: AFFX-HSAC07/X00351_3_at AFFX-HSAC07...
抗beta-Actin兔多克隆抗体(内参抗体) 内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(Housekeeping Proteins),它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在Western Blotting 实验中,除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样...
2,电泳结束后去一部分胶做考马斯亮蓝染色,看看有没有目的条带和内参条带 3,转膜后,对转膜后的胶做考马斯亮蓝染色看转膜是否彻底,对膜进行丽春红染色看看目的蛋白和内参是否转上。然后再用洗脱液洗净就可以继续下面的步骤。 4,加二抗时内参的二抗和目的基因的二抗不要加错。 请及时反馈试验进展,看看问题处在哪...
另外,虽然β-Actin是最合适的内参抗体之一,但是在某些条件下,一些因素也会导致样品间β-Actin含量的变化。特别需要注意的是,在脂肪组织里,β-Actin的表达量非常低,不适合作为内参。 应用[4][5] 用于虾夷扇贝beta-actin基因和G型溶菌酶基因的克隆与表达研究...
我想做PCR内参选beta-actin还是GAPDH好 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD。一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 b
Beta Actin为管家(house keeping)基因,几乎在所有组织中都高水平表达,并且在各细胞或者组织中的表达量相对恒定,因此beta Actin蛋白在Western Blot实验中常作为内参使用。 辉骏生物beta Actin抗体可识别人,大鼠,小鼠,仓鼠,猪,猴子,犬,牛,鸡,鸭,斑马鱼,果蝇,拟南芥等多物种的beta Actin蛋白。 Beta Actin(β-Actin...
p了好几次，目的基因出来了效果很好，内参却没有 求各位大神指教！！内参序列：S：5-TAGGTTGGTAGACG...
GAPDH,Tubulin,Actin做WB内参如何选择呢? Actin即肌动蛋白,分子量42kDa,是一类形成微丝的球状多功能蛋白质,基本上存在于所有真核细胞中。哺乳动物至少有6种肌动蛋白异构体由不同的基因编码, 根据它们的等电点分为三类(α, β和γ),一般来说,α肌动蛋白存在于肌肉中(α-骨骼,α-主动脉平滑,α-心脏),而β和...
要考虑几点哈：目的蛋白出来，内参不出来，可以排除蛋白的问题；内参的抗体稀释比例好多；内参抗体是否过期...