X-Gal是β-半乳糖苷酶(LacZ)的反应底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物,常需要配合IPTG使用用于蓝白斑筛选。而X-α-gal是酵母α-半乳糖苷酶(MEL1)的反应底物。X-α-gal用作酵母双杂交系统中蓝白筛选的筛选标记。二者不可以互相替换。 翌圣生物推出的X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半...
X-α-Gal可在培养基上直接检测酵母双杂交相互作用，利用此底物可以省去双杂交体系中的β-半乳糖苷酶溶液和filter-liftassays；X-Gal用于检测LacZ基因合成的 β-半乳糖苷酶的活性。由于β-半乳糖苷酶不能分泌，需裂解酵母细胞后通过加入β-半乳糖苷酶溶液和filter-liftassays才能进行显色，因此操作流程相对繁琐。携...
MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因,编码外泌型的α-半乳糖苷酶。如果蛋白无互作,报告基因MEL1不表达,菌落呈乳白色;如果蛋白发生互作,报告基因MEL1表达,菌落呈蓝色,亦可根据菌落蓝色深浅,初步判断蛋白互作强度。X-α-Gal与缺陷型筛选平板同时使用,可有效提高筛选效率,排除假阳性克隆,主要应用于酵母双杂交实验...
是因为等待时间不足够，因为实验中我们发现互作很强的阳性对照3至4个小时就会变蓝，通常我们自己的蛋白最常见的是12至24小时变蓝。也有些在24小时之后有变蓝。与整个实验条件，蛋白互作的强弱都有关系。
1. 在酵母双杂实验中，观察到的颜色变化是评估蛋白质互作强弱的重要指标。2. 实验结果显示，阳性对照在3至4小时内变蓝，这通常预示着蛋白质之间存在较强的互作关系。3. 在本实验中，我们观察到蛋白质互作的结果并没有在预期时间内变蓝，可能是由于实验操作的某些环节出现了问题，或者是因为实验条件不...
酵母双杂交用X-gal显色要注意哪些事啊!10 423244/1 返回列表 查看: 4778 | 回复: 9 只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏 在APP中查看 【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 天际雾影 的 4 个金币,回帖就立即获得 2 个金币,每人有 10 次机会 相关版块跳转 生物科学 我...
X-α-Gal与酵母双杂交系统: 酵母双杂交筛选是体内用来检测蛋白-蛋白相互作用的一种遗传分析实验,此方法由Prof. Stan Fields及合作者开发用来调查两个已知蛋白的相互作用,另一个重要应用是从文库内筛选并鉴定某一特定蛋白的未知结合蛋白。阳性克隆也就是那些能够激活报告基因转录子,使得营养缺陷型酵母双杂交菌株在营...
GAL4系统酵母双杂培养基套装+(含AbA,X-α-gal) 英文名:GAL4 Yeast Two-Hybrid Media plus Kit储存条件:-20℃ 产品说明: Yeast Two-Hybrid Media Kit酵母双杂培养基套装试剂盒)包含酵母双杂交文库筛选中所需要的全部培养基。整套购买,性价比更高。培养基以非常方便使用的铝箔袋形式包装,每个独立包装可以配制0.5...
几乎所有酵母杂交的实验中,均使用DMF溶解X-α-gal。X-α-gal也溶解于甲醇和DMSO。经过验证酵母杂交的实验中DMSO可以用于X-α-gal的配制与稀释。但DMSO熔点高,使用不便。甲醇还未经验证。 11.杂交效率不高,怎么办? 效率不高,可能是杂交细胞数量不够,适当增加诱饵蛋白的液体培养量,保证有足够的细胞数量。可以延长...
一般是用4ng/mL，但是我亲测用2ng/mL也能显色了，非常蓝。