其原理是:pUC质粒含Ampr,可供菌落筛选,质粒载体带有大肠杆菌乳糖操纵子的lacZ’基因,该基因含一段编码β-半乳糖苷酶氨基末端145个氨基酸α-肽的DNA片断,IPTG可诱导此片断合成,此片断能与宿主细胞所编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内α-互补,形成完整的β-半乳糖苷酶。该酶能催化无色底物X-gal生成半乳糖和深...
简述用Xgal 进行蓝白斑筛选的原理。 参考答案: b-半乳糖苷酶(LacZ)能把无色的化合物Xgal 分解成半乳糖和一个深蓝色的物质5-溴-4-氯靛蓝。b-半乳糖苷酶N 端的一段氨基酸片断(11-41氨基酸),受体菌基因组的b-半乳糖苷酶基因的氨基端有缺失(缺失a 肽),不能形成4聚体的活性酶,不能分解Xgal。质粒载体上...
细菌蓝白斑筛选原理:IPTG为安慰型诱导物,可诱导β-半乳糖苷酶的产生,X-gal是β-半乳糖苷酶的作用底物,在β-半乳糖苷酶的作用下X-gal被切割成半乳糖和深蓝色的物质:5-溴-4-靛蓝,有色物质可使所在的菌落呈现蓝色。但当含有lac启动子的质粒中插入了外源基因,则不能产生β-半乳糖苷酶,因此不能分解X-gal产生...
除了抗生素抗性筛选之外,蓝白斑筛选也是分子克隆过程中常用的一种方法:当外源DNA插入到载体lacZ标记基因上,导致β-半乳糖苷酶基因失活,可通过大肠杆菌转化子菌落在添加有X-gal-IPTG培养基中的颜色变化直接观察出来。 β-半乳糖苷酶可把乳糖水解成半乳糖和葡萄糖,当宿主细胞培养在补加有X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚...
蓝白斑筛选利用的原理包括()A.β半乳糖苷酶和X-gal的显色反应B.lacZ的α胎互补C.α互补的插入失活D.受体菌发生了lacZ突变
大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因,其编码的产物β半乳糖苷酶在Xgal和IPTG存在时,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色,该过程称为蓝白斑筛选.基因工程中常利用该原理从受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞,过程如图所示.下列说法错误的是( ) A. 蓝白斑筛选不属于个体水平的筛选 B. 转化过程中,大肠杆...
细菌蓝白斑筛选原理:IPTG为安慰型诱导物,可诱导β-半乳糖苷酶的产生,X-gal是β-半乳糖苷酶的作用底物,在β-半乳糖苷酶的作用下X-gal被切割成半乳糖...
细菌蓝白斑筛选原理:IPTG为安慰型诱导物,可诱导β-半乳糖苷酶的产生,X-gal是β-半乳糖苷酶的作用底物,在β-半乳糖苷酶的作用下X-gal被切割成半乳糖和深蓝色的物质:5-溴-4-靛蓝,有色物质可使所在的菌落呈现蓝色。但当含有lac启动子的质粒中插入了外源基因,则不能产生β-半乳糖苷酶,因此不能分解X-gal产生...
细菌蓝白斑筛选原理:IPTG为安慰型诱导物,可诱导β-半乳糖苷酶的产生,X-gal是β-半乳糖苷酶的作用底物,在β-半乳糖苷酶的作用下X-gal被切割成半乳糖和深蓝色的物质:5-溴-4-靛蓝,有色物质可使所在的菌落呈现蓝色。但当含有lac启动子的质粒中插入了外源基因,则不能产生β-半乳糖苷酶,因此不能分解X-gal产生...