首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存),然后在100 ml的琼脂培养基中,加入200μl的上述溶液、100μl的IPTG(24 mg/ml)和100μl的Amp(100 mg/ml),制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体(或其他带有lacZ、Amp基因载体),然后转化至lacZ
首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液（-20℃避光保存），然后在100 ml的琼脂培养基中，加入200μl的上述溶液、100μl的IPTG（24 mg/ml）和100μl的Amp（100 mg/ml），制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体（或其他带有lacZ、Amp基因载体），然后转化至lacZ缺失...
首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存),然后在100 ml的琼脂培养基中,加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG(24 mg/ml)和100 μl的Amp(100 mg/ml),制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体(或其他带有lacZ、Amp基因载体),然后转化至lacZ缺失细胞中后...
本制品是用二甲基甲酰胺溶解X-gal配制成的20mg/mL的贮存液。适用于蓝白斑筛选时培养基的配制。无需灭菌,可直接使用。 组分 规格 X-Gal溶液(20mg/mL) 1mL 说明书 1份保存:-20℃ IPTG和X-Gal在涂板时无先后顺序要求。也可混匀后涂布,但IPTG与X-Gal的混合液不能加入到将要涂布的菌液中,否则容易使菌液致...
1. 弃培荞上清并加固定液,室温下,在通风橱中与2%低聚甲醛共育60 min,或与0.05%戊二醛共育5~15 min。2. 根据实验室化学物弃置规程弃去固定液,室温下用PBS充分洗涤细胞3次,第1次和第3次是快速洗涤,第2次洗涤时,可保留PBS于细胞上10 min。 3. 加入能覆盖细胞的最小量Xgal溶液,37℃温育1 h 或过夜,阳性...
X-Gal在β-半乳糖苷酶的催化下水解成蓝色,因此常用于转基因筛选测试,例如蓝点和白点筛选或β-半乳糖苷酶原位染色检测实验,在蓝点和白点测试中,可以根据菌落的颜色简单地选择转化子。 分子式为:C 14 H 15 BrClNO 6,分子量为:408.63,CAS号:7240-90-6。 X-Gal是β-半乳糖苷酶的底物,水解后呈蓝色。基于此...
X-Gal溶液,20mg/mL(一)、煮沸法 1、将1.5ml培养液倒入eppendorf管中,4℃下12000g离心30秒。 2、弃上清,将管倒置于卫生纸上几分钟,使液体流尽。 3、将菌体沉淀悬浮于120ml STET溶液中, 涡旋混匀。 4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 涡旋振荡3秒钟。 5、将eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取...
1. X-Gal储存液配制: 称取0.2g X-Ga|装入15m|离心管,加入10ml DMF ,鹿荡使其充分溶解。按照1m/管分装,并用铝箔纸包裹离心管使其避光,置于-20C冻存,正常情况下6-12个月稳定。 2. IPTG储存液配制: 称取0.238gIPTG溶于10ml去离子水中,充分溶解混匀后,经0.22um滤膜过滤**,即得到100mM ( 100x )的储存...
常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选。 配制储存液: 称取200 mg X-Gal于15 mL 离心管,向其中加入10 mL DMF,旋涡震荡使其充分溶解后于-20℃避光保存,正确操作下,有效期可达5-12个月,如小量频繁使用,建议分装成1 mL/管后避光冻存。 蓝白斑筛选: 1. X-Gal、IPTG 加入琼脂培养基溶液1)高压...